标题:蔗糖梯度溶液线粒体实验科研型光学显微镜常识

信息分类:站内新闻   作者:yiyi发布   时间:2016-11-12 23:57:36 将本页加入收藏

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正文:

蔗糖梯度溶液线粒体实验科研型光学显微镜常识

    线粒体
    大鼠肝脏和牛心脏是用于呼吸研究的线粒体的常用来源。在这
些研究中,细胞器的产量并不是主要考虑的,取而代之的是方法本

身要求尽可能得快速和温和。使用良好的介质和仅3000g离心力来
制备“重组分”线粒体就符合以上要求。密度梯度离心可以实现从
“重+轻线粒体”组分中更完整地回收线粒体。由于蔗糖梯度溶液
具有高摩尔渗透压浓度,线粒体、溶酶体和过氧化物酶体的密度范
围有相当大部分的重叠。Percolr和Nycodenz以及碘克沙醇的等渗

梯度溶液提供了更优越的分辨率。Nycodenz中线粒体的密度比碘克
沙醇稍高一点,因此提高了它们与较轻的溶酶体的分辨率。由于酵

母线粒体目前广泛用于许多功能和结构研究之中,实验方案4.9描
述了广泛应用的这些线粒体在Ny—codenz@梯度溶液中的纯化过程
。在底部上样的不连续梯度溶液中漂浮分离通常会提高分辨率,这
种方法现在已应用于酵母线粒体分离。然而,观察哺乳动物线粒体
发现,将粗制的线粒体组分放于梯度溶液底部时,高流体静压会导
致线粒体结构的部分破裂

也可参看实验方案,该方案描述了用于从轻线粒
体组分中纯化所有主要细胞器的梯度溶液。











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