标题：大分子可用电子显微镜直接观察,样品制备有许多技术
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作者:yiyi发布
时间:2016-2-3 0:30:08
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正文:
大分子可用电子显微镜直接观察,样品制备有许多技术
电子显微镜
大分子可以用电子显微镜直接观察，样品制备有许多技术，这
里介绍两种。
观察核酸的常用方法是展开技术，核酸分子比任何蛋白质分子
都要大得多，把核酸分子包埋在一层蛋白质膜中，于是它就襄上
一层蛋白质分子，如图所示，蛋白质分子起两个作用：
1、它们使核酸分子伸展开来，原因如下，如果反悔很小体积
的蛋白质溶液铺到离子溶液表面，蛋白质分子会展开形成蛋白质
单层薄膜，如果核酸分子在蛋白质溶液中，它们也随蛋白质膜扩
展面伸展开来，核酸分子的伸展使得整个分子清楚可见，不至于
象在没有伸展情况下看到的那种缭绕和分子间聚集。
2、蛋白质在核酸分子上形成一层厚的覆盖层，这覆盖层使核
酸分子容易看得见，为了观察清楚还需要其他一些东西，因为仅
含小原子的分子对电子通常是近乎透明的，因此，为了使核酸分
子可见，覆盖的蛋白质层的分子还得涂上一层重金属，这可以将
铂原子 或沉积在蛋白质涂层上，称为染色，这些重原子是电子
良好吸收物，而背景支持物相对地很少吸收电子，因此，这引起
金属离子提供了图像的反差，在对于分子的长度和线状拓扑结构
感兴趣而想观察很长分子时，投影和染色是很有用的技术。
如果用刚才所讲的蛋白质单层技术还不容易看清楚 ，或是在
对所研究分子的形状和表面细节感兴趣时，可以用另一种方法分
子， 这就是负反差技术。例如，蛋白质分子如果包埋在蛋白质
膜中，就无法看到，对此另一种可选择的方法是涂一层非常薄的
金属原子，如果这些原子很小，涂层也只有一二个原子厚，那么
这些原子就会沿着粒子的外形排列，这可以用很少量的原子染色
，但是更方便的是用负反差技术，这种技术是观察的蛋白质分子
或病毒粒子与磷钨酸，或盐溶液混合，两者都含有强烈吸收电子
的原子，然后将溶液滴涂在支持膜上，含有所研究的大分子或粒
子的微滴便在支持膜上干燥，微滴上有大分子在处有金属离子的
厚度比其他地主要薄，把样品放在电子束中时，穿过微滴大分子
区域的电子就多些，这样就可得到一些或小的病毒粒子的负像，
用这各方法观察到手病毒粒子和蛋白质分子的电子显微镜照片。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科