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正文:
负染色与简单染色的对比
一、目的:比较负染色与简单染色细胞的差别。
二、原理:
(1)负染色为例:细菌若与酸性染料(苯胺黑Nigrosine)发色团离子接触因与细胞膜磷酸根带阴
电荷相斥无法于细胞形成明显颜色,仅细胞外围背景着色(○-○-相斥)。
(2)简单染色为例:细菌细胞膜的磷酸根含有大量的阴电荷而包围于细菌细胞的外围,故能与
盐基性染料的发色团离子(带阳电荷)结合而使细菌细胞着色,使细菌细胞与周围的介质颜
色鲜明利于观察。
三、材料:
1.显微镜 2.拭镜纸 3.洋杉油 4.二甲苯 5.酒精灯 6.载玻片 7.试管架 8.蒸馏水 9.95%酒精
10.接种环11.染色盘 12.玻片夹13.镊子14.染剂:○1苯胺黑○2结晶紫
15.菌种:Pseudomonas 假单胞杆菌
四、方法:
(1)负染色:二片slide 洗净烘干备用→滴苯胺黑→取菌液与苯胺黑涂开→取另一片slide 平铺
均开→自然风干→观察→画图并纪录
(2)简单染色:一片slide 洗净烘干备用→无菌取菌于slide 涂开→烘烤固定→结晶紫染剂
(○+染色)→背面水洗→试干→观察→画图并纪录
(1)染剂(dye)种类:○1带○-电荷染剂+○-
金属离子Na+、K+→酸性染剂(acidic dyes)
○2带○+电荷染剂+○-酸根离子Cl-、SO4
2-→碱性染剂 (basic dyes)
(2)印第安墨水(Indian Ink)、苯胺黑(Nigrosine)、结晶紫(Crystal videt)
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科