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正文:
传统的酵母菌计数以培养法需23天的时间,而直接
显微镜计数法虽能
快速的计数,但无法准确区别死菌和活菌,使其应用性降低。
以活细胞核酸染剂(live cell nucleic acid stain)染色酵母菌和细菌,除了与菌体的的
DNA结合而使细胞核和粒线体在萤光显微镜下呈现黄色萤光之外,该染剂还
会使活菌的细胞质呈现绿色萤光,而死菌的细胞质呈现橙色萤光。
因此,一方面以直接显微镜计数总菌数,另一方面以直接萤光染色显微镜计数法求得
呈绿色萤光的活菌数比率,两者相乘即为估算活菌数,其结果与传统培养法
所得结果之相关系数酵母菌为0.91,细菌为0.96,并且只要30分钟即可完成估算活菌数。
活细胞核酸染剂、直接萤光染色显微镜计数、直接显微镜计数、活酵母菌、活细菌、快速检测
萤光产生的原理是萤光染剂受到
可见光或紫外光等较短波长具有较高能量的光激发,要回到稳定组态的能阶时,
会放出较长波长的萤光,非萤光物质则成为黑色背景。
一般萤光的波长要比吸收光的波长要长,且分子必需先吸收能量才能发散萤光。 运用萤光原理的
设备皆有一组萤光滤镜,包含两个镜片---激发光滤镜片及释放光滤镜片。
激发光滤镜片即利用特定滤镜片来激发特定波长范围的萤光染剂,免除不必要的萤光被激发。
而萤光染色技术除了提供观察单一细胞之形态与重要生理现象外,快速而且灵敏度也高
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科