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正文:
高pH下碱性抗生素(红霉素。泰乐菌素、链霉素和缠霉素)的活性
永远比较低pH下的活性高。中性抗生素(氯霉素)的活性与培养基的pH
无关。pH灵敏度的这种特性可用于调节抗生素测定的范围,这是因为
游离酸和游离碱是活性化合物,它们的浓度是溶液中pH的函数。
大多数抗生素在pH6。7或8的磷酸缓冲液中稀释到测定浓度.pH6
的缓冲液用于酸性抗生素,如青霉素和头孢菌素。pH8的缓冲液用于碱
性抗生素。测定培养基的pH也接近于pH7的缓冲液的pH。选择缓冲液和
培养基的pH,使之提高测定方法的灵敏度。例如,青霉素G比浊法测定
,在pH6测定的灵敏度,为在pH?测定的灵敏度的1.5倍。红霉素在pH7
测定的灵敏度为在pH6测定灵敏度的5倍。由于稳定性的原因,四环素
在pH4.5的缓冲液中稀释,在pH7的培养液中测定。当测定稳定的酸性
抗生素时,为了获得最大的灵敏度,应当采用能够使敏感的细菌生长
的低pH。
当有些物质对测定有干扰时,必须采用其他的稀释剂,如在莫能
菌素的测定中,钾离子有干扰;或者如潮霉素B的测定中磷酸盐有干扰
。应该一直牢记,缓冲液和培养基的成份可能对测定产生干扰作用。
干扰作用通常表现为降低测定方法的灵敏度。
一般说来,样品在缓冲液中稀释倍数很大,结果样品起始的pH并
不影响稀释好的样品的pH。但是,当稀释倍数不很大的情况下,起始
的pH就很重要。这样在稀释以前,应该将pH调节到缓冲液的pH。另一
类pH起重要作用的例子,是在高缓冲容量的高浓度盐溶液中的抗生素
的浓度相当低,例如从色谱柱上流出的洗脱液。除非样品可以大大稀
释,足以使其盐类的缓冲容量降低到所用缓冲液的缓冲容量,否则无
法得到准确的结果。当发生这种情况时,人们所能做的最好的事情是
认清不准确的结果的可能性,而不要对其寄予太大的希望。所有这些
讨论的要点在于,如果希望测定结果可靠的话,样品和标准晶必须在p
H相同和缓冲容量相同的溶液中进行测定。幸好,这个问题,通常可以
用样品
出自http://www.bjsgyq.com/
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