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正文:
支架的制备
一张醋酸纤维膜切到比玻璃载片略小一些。在玻璃载片上倒一薄层丙
酮,并将醋酸纤维膜压在玻璃载片上,使其干燥,接着在醋酸纤维膜上覆
盖一薄层“Araldite'’液,“Araldite"液在醋酸纤维膜上散开,正好超
出醋酸纤维膜到玻璃载片上,并逐渐变硬。因为"Araldite"液对醋酸纤维
膜封片是一个重要的步骤,其后将整个被封固的玻璃载片都浸在丙酮中
揭片的包埋及制备
揭片用低浓度酸蚀刻来制备,并对修块的表面仔细修理,主要根据上
述3种方法中的一种,同时尽可能保持细胞壁物质完好。接下来将揭片从岩
体上取下,将薄层Araldite液扩散到含有机质的醋酸纤维膜边缘。加热到5
5~C,使Araldite液成流动液体,接着牢牢地按到已制备的Araldite支架表
面,并让其固定。将玻璃薄片放人有丙酮的浴锅中(带有搅拌器)15分钟,
以完全分解揭片上的醋酸纤维膜,只留下有机质。
接着对有机质用0.05%的盐酸作用1—2小时,以去掉残留的方解石碎
屑,注意避免损坏细胞壁。在光学显微镜下用油镜镜头观察标本,油可以
直接加到标本表面,看后擦去。
在光学显微镜检查后,标本的特定部分可从底部支架的醋酸纤维膜上
切下(这是因为周围由Araldite包围而不受丙酮影响),并与玻璃薄片分离
。接着放到合适的电镜座上作扫描电镜观察,或制成包埋块,进一步切片
,作透射电镜观察。这个技术的优点之一是,标本能在高倍率下用不同类
型的显微镜查看,以证实或小心排除潜在的假象。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科