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正文:
扫描电镜研究超微结构分析化石花粉粒细胞壁
在超微结构分析中,大孢子是一种常见的研究对象。大孢子个体大,
可单个处理,其外表形态及内部壁结构具有丰富的多样性。这些特征为解
释异孢型植物的系统发育提供了有用的资料。研究化石大孢子以来,已积
累了大量的资料。在这期间,技术上并无多大改进,只是在仪器使用和成
像系统方面有所进展。
扫描电镜(SEM)-F的超微结构
扫描电镜研究超微结构不如透射电镜,其主要原因是:在对细胞壁断
裂面观察时,扫描电镜的分辨率不如透射电镜。但是,扫描电镜成像提供
了壁的主体图像,而在透射电镜研究中,这些结构只能通过综合系列切面
获得,化石大孢子壁最软部分可能就看不到。在可能的条件下,透射电镜
研究细胞壁结构的同时,应采用扫描电镜照片来补充,并做出对应的解释
。这种
立体像对图像是很有效的(如Taylor,1990)。进行扫描电镜观察的
细胞壁可用刀片切出新鲜断面,而旧断面可能会有擦痕。尽管硝酸和舒氏
液能清洗大孢子,但是其氧化反应改变了孢粉素的化学性质,导致内聚力
降低,并可能改变超微结构。
染色剂和超薄切片机
已有许多方法应用于对化石花粉粒超薄切片的染色中。某些研究人员
采用戊二醛处理花粉粒,并在包埋前再用锇酸处理。但是,大多数研究者
采用在切片后染色。在化石孢粉的细微结构研究中,最常用的染色剂是2%
的乙酸双氧铀、2%的高锰酸甲水溶液和0.25%的柠檬酸铅。
玻璃刀多用于化石孢粉的切片中。但是,特别是在切片的颜色为银色
至金黄色、而又需要特别精细的壁层结构时,金刚刀显示了很好的优越性
能。切片一经切下,可用1 mmX 2mm的有槽载网收集,并干燥。载网上有一
层福尔蒙瓦尔膜。对较大花粉粒,可不必使用支持膜。在这期间,切片可
采用染色程序来进行后染色(post-stain)。除了处理大量的花粉外,可以
采用多种染色程序,切片在不同浓度染液和不同时间内染色。例如,对于
种子蕨花粉,用2%的高锰酸甲水溶液染色30分钟,在黑暗中用2%的乙酸
双氧铀处理7小时,这样可以取得最佳效果。尽管这个过程很耗时,但是是
必要的。通过试验不同浓度染液和不同染色时间,其结果是可以最大限度
地从切面中获取信息。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科