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分光光度计吸光度的校正方法和步骤！

　　　　当进行分析检查如果不用化学性标准物,其吸光度之准确便成为分析时

　　直接的依据,而影响吸光度差异,主要有波长,迷光(stray light),光源老化以及波宽

　　(bandwidth),常使用标准滤镜(如 NBS,SRM 930)或是配製标准溶液(如potassium

　　dichromate,cobalt ammonium sulfate,pot. nitrate) 作为校正吸光度之方法。其中

　　pot. dichromate solution 是使用最多的一个方法。

　　1、校正频率 : 每3个月校正一次。

　　2、药品配製 : (acid pot. dichromate solution)

　　　　(1)从desicater中取出potassium dichromate(NBS SRM 935)

　　　　(2)称空的1L体积瓶重量归零。

　　　　(3)分别精确称取20mg,40mg,60mg,80mg及100mg的Pot. Dichromate。

　　　　(4)慢慢加入0.001N HClO4 Solution(in H2O),直到1kg (±0.01g)。

　　　　(5)溷合均匀,放入棕色容器,避光保存并且于当天完成校正工作。

　　3、校正方法 :

　　　　(1)cuvette先于36N sufuric acid浸置1-2小时后 ,依序以 24N,12N,6N的sufuric

　　　　　acid,及蒸馏水冲洗cuvette后慢慢阴乾。

　　　　(2)分光光度计温机至少30分钟。

　　　　(3)以拭镜纸擦拭cuvette后,慢慢插入cell holder 中(直到校正完,才能再取出

　　　　　或移动)。

　　　　(4)依(表二)选择波长及波宽,并记录校正时的室温(t)。

　　　　(5)以玻璃製dispossable dropper取0.001N HClO4 rinse cuvette 5次,第6次

　　　　　放入后立即加盖,归零。

　　　　(6)同样方法依(表二),分别吸取不同浓度之potassium dichromate测定各浓度

　　　　　下之吸光度。

　　　　(7)测得之吸光度(A)代入 ε(t)= A/b*c,并依(表三)调整温度至ε(23.5)℃ 。

　　4、判别:

　　　　(1)若band width与(表二)同则以在(表二)所列ε(23.5) uncertainty范围为

　　　　　准确吸光度。

　　　　(2)bandwidth=5-8nm则ε(23.5)误差<3%则可接受。

　　5、不准确时处理方式:

　　　　(1)检查溶液配製是否有误。

　　　　(2)检查cuvette是否乾淨或放置不当。

　　　　(3)仪器是否加盖紧密。

　　　　(4)检查bandwidth 。

　　　　(5)校正波长。

　　　　(6)换Lamp source 。

　　　　(7)若检查以上因素仍无法改善,则请厂商工程师维修。

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