冷冻切片机简易操作步骤

信息分类:金相文章   作者:yiyi发布   时间:2011-12-3 17:48:04 将本页加入收藏

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冷冻切片机简易操作步骤
1. 将标本台木(铝材质)置于快速冷冻台上降温。
2. 待标本台木降温后(约10-15分钟),由快速冷冻台取出,平置于桌面。滴一滴冷冻包埋剂(cryo tissue embedding compound)于铝质标本台朝上之一端。然后将新鲜材料切成约3-5 mm长或宽之大小,并将材料埋入冷冻包埋剂中。再滴2-3滴于标本上使之完全包埋,并立即将标本台木放回快速冷冻台降温。包埋时,要求动作干净,利落,迅速,并切记勿使标本周围产生气泡。
3. 约3-5分钟后冷冻包埋剂即完全凝结,即可将标本台木装架在切片机之标本固定夹上。设定切片角度,切片厚度及操作箱温度,进行冷冻切片。
4. 调整切片刀上方压克力制反卷曲装置(anti-roll device)之位置及间隙,使其前缘与切片刀之刀刃平行。
5. 进行单片切片,若反卷装置调整适当,则切片应如三明治状夹在切片刀与反卷曲压克力装置之间。
6. 将反卷曲压克力装置向上移开,取常温之清洁玻片,使之与切片靠近贴合。低温之切片遇常温之玻片即展平并融解。切片需暂存放于无灰尘的切片盒中晾干,并使标本与载玻片充分黏合,再进行下一阶段的染色,以避免材料中途脱落。
☆ 注:各种生物标本之质地差异颇大,冷冻切片之成败关键在于操作箱的温度,一般而言,植物材料所需的温度较高,可由-17℃~-18℃开始试切,
视结果再作温度调整。动物标本则可忍受较低的温度,尤其含脂肪量  高的标本在-20℃~-30℃之间为适当的温度。整体而言,刀口的温度
 -10℃至-20℃之间,可以满足约80%标本的温度需求。

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