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信息分类:生物-生命科学资讯   作者:yiyi发布   时间:2012-6-17 1:04:03 将本页加入收藏

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正文:

实验预习:实验是从动物的器官中分离细胞,将细胞染色于显微镜下观察。
三、实验目的:利用PES将精子冲洗下来之后,于显微镜下观察其型态。
四、实验原理:
1. 精子细胞为一个拥有半套染色体且具有泳动能力的体内细胞。精子于睪丸中形成之后,会进行所谓的泳动特性,此时它仅能移至储存的位置副睪丸处。
2. 在成功受精过程中,精子们必须继续往前游动,当精子进入女性生殖道颈口时,精子的游动速率会变的愈来愈慢。精子们能藉由排卵作用而重新获得泳动的能力,以便能达到输卵管的上部位置并进行与卵的受精作用。
3. 目前有多位科学家从事环境贺尔蒙、药物及精子本身离子管道的研究,精子泳动能力的针测是不可或缺的一个基本实验。
五、实验步骤:
将鸡睪丸以RO水清洗表面,去除不必要的污水
以剪刀将鸡睪丸剪开,置于10公分组织培养皿上
以PBS来回冲洗剖面处,以利于精子的泳出
吸取含有精子的PBS溶液,以滤纸过滤
置于玻片上染色后观察
六、实验结果:
    本次观察精睪丸中的精细胞主要有三种染色方式,分别为trypan blue染色法,;再者为以Liu’s stain染精细胞;最后为以Giemsa stain染精细胞。在trypan blue染色中可以看到精子游动的情形。
七、结果讨论:
    在精细胞经过trypan blue的结果当中,蓝色的为死掉的精细胞,亮白色的为活的精细胞。在刚开始的显微镜观察中可以看到游动的精细胞,且可以看到完整的鞭毛构造。
    在图三及图四精细胞经过Liu’s stain的结果中,可以看到蓝紫色的核酸及鞭毛构造。因为细胞经过高速离心的动作,所以精细胞都已经死亡,而且可以看到鞭毛已经脱离了精细胞,但由圗中仍可以看到完整具有鞭毛的精细胞。
    圗五及图六为精细胞经过Giemsa stain染色后的结果图。本次实验第一次用到Giemsa stain,细胞经过显微镜观察后可以看到细胞呈灰白色。由于Giemsa stain不需要将细胞离心处理,所以也可以看到很多完整具有鞭毛的精细胞。
八、实验心得:
    这是我们第一次利用动物的器官进行实验,并以染色的方式观察其结果。在刚开始的玻片观察中可以看到精细胞游动的样子,但是之后因为细胞处理的时间过长,精细胞大部分都已经失去其活性,所以在显微镜下看到的精细胞大部分都已经不会动。我觉得这对我们而言是一个很难得有趣的经验。










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