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正文:

实验/实习原理

利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行

定性或定位研究的技术，藉以利用明视野光学显微镜观察细胞形态上的变化。

实验/实习药品与设备

1、 Cytospin 3细胞自动离心固着机

2、 刘氏染色液(Liu Stain)

实验/实习内容与步骤

1、 Cytospin 3细胞自动离心固着机：

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(一)Cytospin 3细胞机为英国Shandon 公司生产。

(二)密封离心头有12个样本室（离心头可高温消毒）。

(三)随机配有12个样本夹，单孔离心漏斗及相配套的滤片供你选用。

(四)总体积＜350ml，装入离心头的样本室内。

(五)要注意对称、平衡。

(六)滤片经消毒处理可复用。

(七)一次可处理12个样本，涂片范围294平方毫米。

(八)一次约需使用2 x 104 颗白血球细胞，细胞量要正确。

2、 Cytospin巧妙地利用力学原理，通过旋转产生的离心力将细胞从其悬浮液

中分理出来，然后让沉积细胞在载玻片，液体则被过滤片吸收。

3、 细胞自动离心固着机製片过程：

(一)细胞离心机内置一隻可高速旋转的密封盘，叫做密封离心转子。

(二)密封离心转子内有十二个穴腔，叫做样本室。

(三)样本夹将载玻片紧夹在衬有过滤片的离心漏斗平面，嵌于样本室的导

槽

内。

(四)样本液 (约2 x 104 颗白血球细胞，总体积＜350ml) 注入固定好的离心漏

斗喇叭口内（注意对称、平衡）。

(五)盖紧离心头盖，放入离心机，并检查正常锁定机盖后，选择程序，开

始离心。通过旋转产生的离心力，将悬浮在样本液中的细胞分离并沉积

在载玻片上，样本液的液体则被过滤片吸收。

(六)用速度控制键控制离心机转数，范围800～1000rpm；用高低档加速控

制

键控制速度变化率。

(七)运行时间可约5分钟，并可设置23个程序供选用。

(八)白血病细胞常规使用约设定800rpm。低档加速800rpm/5分钟。

(九)离心完毕，取下玻片，立即染色固定标本。载玻片上形成一形态完

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好，单层平铺的细胞。

(十)清洗样本夹，漏斗和滤片浸泡在清洁液中洗淨，再以酒精消毒液浸

泡，

清洗烘乾备用。

(十一)离心机用消毒液擦洗，再用乾纸巾擦淨备用。

4、 刘氏染色液(Liu Stain)：

(一)刘氏染色液(Liu Stain)是由台湾大学刘祯辉教授在1953年所研究发表的

一种染色技术。

(二)主要应用于血液抹片染色，它跟瑞特氏染色(Wright Stain)一样，都是利

用瑞氏染色「Romanowsky Stain」原理改良而成的，所得到的结果也跟

瑞氏染色液相类似，只是刘氏染色液所花费的时间非常短，只需90秒即

可完成染色步骤。

(三)刘氏染色在临床上的应用非常广泛，除了主要作为血球形态分类染色之

外，也可以当作组织学的简易染色，在临床细菌学上的使用更可以作

为阴道分泌物、痰液、浓液等检体的简单染色剂(Simple Stain)。

5、 Liu’s stain步骤：

(一)Liu’s A溶液0.2 ml，覆盖于标本上。

(二)染色30秒后。

(三)逐渐滴滴上Liu’s B溶液0.4 ml (2 x体积Liu’s B)，用吸球吹气，使二液溷

合均匀。

(四)1~2分钟后，用水冲洗至标本色呈澹红紫色，乾燥后就可镜检。

(五)标本之新旧及水之pH值影响染色效果甚大。

(六)标本宜于当天染色并採用蒸馏水冲洗。

注意事项

1、 Cytospin 3 细胞离心涂片机操作注意事项：

(一)加入的漏斗内的液基样本量＜350ml。按装漏斗杯注意对称、平衡。

(二)漏斗杯的装取均应在机外进行，因离心机中央的装置较精细、灵敏，在

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机内操作，易影响平衡，产生故障。

(三)漏斗内液基样本量较多时，滤片不能吸尽，会甩入离心头。应清除后进

行下一次操作，否则影响平衡。

(四)离心转子密封圈一定要放正，如果未正确放置，离心时液体极易从离心

头内甩出，进入离心机，要及时擦乾离心机内的液体，否则液体进入马

达，引起马达生锈，导致故障。

(五)离心机每天使用结束后，要做好清洗、消毒、保养工作。

出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科