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正文:
大多数绿色菜叶的色谱图上会显示出类胡萝卜素
步骤:色素的色谱分离
(1)制备展开剂。取lmL正丁醇到lOOmL容量瓶中,并用石油醚
定容,摇匀。注意:远离火源。
(2)向15em的试管中倒上述展开剂约1.3cm,用软木塞塞住。
(3)将Whatman 1号滤纸剪成15cm长1.3cm宽的长条。在长条一
端1.3cm处折出一条横线,用铅笔在横线中心及长条另一端1.3cm
处的中心各点一点。
(4)用微型移液管或毛细管向滤纸条上做标记的点的位置滴一
小滴色素的石油醚提取物,点样量要足够小,直径在0.5cm内。在
相同的点上重复点样4~8次,每次点完后干燥几秒钟,让溶剂充分
挥发,然后再点样。可以先用碎滤纸片进行训练。
(5)用一个大头针将滤纸条从褶缝中心的点钉在木塞底部,确
保滤纸条要垂直悬挂。
(6)将滤纸条放入装有展开剂的试管中。展开剂要接触到滤纸
条顶端,但要低于点样处。
(7)让展开剂向上展开,直到色素分离。
(8)大多数绿色菜叶的色谱图上会显示出类胡萝卜素(它会随着
展开剂的前沿推移,距离底部最远)。蓝绿色的叶绿素a比橄榄绿的
叶绿素b距离滤纸底部远(即叶绿素a展开更快),在叶绿素a前面可
能会观察到脱镁叶绿素a的灰色带。色谱图上可能还会显示出黄色
的叶黄素的点或带。
(9)画出色谱图,并将各点标记出来。薄层色谱
作为一种替代纸层析色谱的方法,薄层色谱可用于分离菠菜色
素。在距离硅胶板的底部约1.5cm处点L含菠菜色素的石油醚提取
物,点样直径在l cm以内。
当点样点彻底干燥后,将硅胶板放入含有溶剂(石油醚一异丙
醇一水,100:5:0.25,体积比)的层析缸中。该溶剂的制备方法
是:将异丙醇加入水中,混合后再加入石油醚。溶剂的深度一定要
低于点样点的位置:当溶剂前沿展开至离点样点约15cm时,从层析
缸中移出硅胶板,干燥硅胶板:
鉴别尽可能多的色素。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科