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正文:
细胞生物量的测定
微生物生长不仅表现在数量增多,也表现在质量增加,也可通
过测定微生物质量的变化釆研究其生长;最直接的方法是测定细胞
干重:首先离心收集液体培养物中的细胞,然后洗涤细胞,之后将
细胞置于烤炉烘干称重。称干重法尤其适用于测定真菌的生长,但
此方法费时,而且不够灵敏。对细菌而言,由于细胞个体重量很小
,至少需要离心几百毫升的培养物才能得到足够的量用于测定。
光线照射到细胞上会发生散射,而且细胞个体在大小上基本一
致,所以光散射的程度与细胞浓度呈正比,人们可利用光比浊法测
定微生物生长,该方法更为迅速、敏感。当细度浓度达到10的7次
方个/mL时,培养基就会呈现轻微的混浊,浓度进一步提高,浊度
增加,能透过的光线就越少。光散射程度可用
分光光度计监测,在
低吸光值范围内,吸光值与细胞浓度呈线性关系,只要细胞浓度达
到能产生可测定的浓度时,就可很容易地利用
分光光度计比浊法测
定微生物的生长。
如果某物质在各细胞中的含量一样,细胞构造中这种物质的总
量就与总的微生物细胞的生物量直接相关。例如,从一定体积培养
物中收集细胞,洗涤后测定总蛋白质量或总氮量,蛋白质量越高,
表明培养物中微生物生物量越多。与此类似,测定叶绿素含量可检
测藻类数量,而ATP的含量可用来估计活的微生物的生物量。
微生物的连续培养 浊度与微生物生物量测定.通过测定吸
光值可以确定微生物生物量,当细胞数量增加导致浊度升高寸,更
多的光线发生散射,通过
分光光度计测得的吸光值增加:分光光度
汁有两组刻度,底下刻度为吸光值,顶上刻度为透光率,吸光值增
加时透光率下降;
微生物的连续培养
以上讨论了在封闭系统进行的分批培养,即不补充新的营养物
质,也不排除产生的废物,对数期仅维持几代就进人稳定期。若在
一个开放系统中培养微生物,在培养过程中不断补充新的营养物质
并排出废物,使该系统环境条件保持恒定,这个系统就称为连续培
养系统(continuous culture system),在该系统中,微生物的生
长可保持在对数期,生物量浓度在较长时期内保持恒定。恒化器
常用的连续培养系统主要有 (1)恒化器(chemostat)和(2)恒
浊器(turbidostat)。利用恒化器进行连续培养时,向培养容器中
加入无菌新鲜培养基的速度与排出含菌培养物的速度相同,培养基
中某种必需营养物质(如某种氨基酸)的浓度控制在限定范围,这样
,系统内微生物生长速度由新鲜培养基加入系统的速度决定,最终
细胞浓度依赖于限制性营养物质的浓度。营养物质更新的速度以稀
释率
出自http://www.bjsgyq.com/
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