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正文:
细菌和真菌污染可以通过在有利于细菌、真菌和酵母生长的条件下
直接培养而检测。同样地,检测支原体污染的直接方法也可用
微生物培
养基促使支原体繁殖,再进行筛查。微生物污染能够通过使用抗生素而
得到控制。微生物污染的检测应列人细胞培养质量控制的常规项目。微
生物和支原体的检测还应在刚收到细胞系时,为细胞库主库和运作库以
及保种所准备的安瓿样本进行检查。这种检查还可以在任何时候、怀疑
有污染、没有抗生素存在而细胞已经培养了几个星期的情况下进行。
细胞的能动性
真核细胞运动和对周围环境作出反应的能力是细胞形态发生的关键
,也是肿瘤细胞侵袭的基础。大多数细胞具有向化学吸引剂迁移的能力
。在趋化运动方面,细胞须能辨认化学梯度的方向,使自己朝向化学梯
度做定向运动。调节细胞趋化运动的过程较复杂,包括伸出伪足、附着
于底物和解除原有附着等。
正常情况下,示踪大分子物质不能进入细胞内。细胞修复时,细胞
内含有示踪物质。最适合用于研究细胞动力学的细胞是盘基网柄菌属阿
米巴虫,这类细胞以分散形式生长,但饥饿时很快聚集成簇,形成多细
胞结构。在聚集成簇过程中,阿米巴表现趋化运动、信号转导、细胞膜
波动、吞噬和分裂等一系列不同行为。以便研究野生型细胞和基因修饰
细胞系的能动性和趋化性行为。真核细胞趋化实验
趋化是指细胞沿化学梯度定向运动的倾向,有助于细胞做变形运动
和在炎症部位聚集。策略设计
细胞根据趋化受体与化学吸引剂结合的变化探测化学吸引剂浓度的
变化。化学梯度最陡和吸引剂浓度稍低于与受体结合呈饱和状态时,趋
化剂与受体结合的变化最大。化学梯度按一定坡度呈直线形上升(如趋
化剂浓度升高lo倍,坡度超过1 mm)时,稍低于受体Ka的化学吸引剂浓
度(该浓度使1/2受体被结合),引起的细胞趋化较理想。因为化学梯度
的几何曲线在不同实验是不同的,所以在合适浓度范围内需要达到较陡
梯度的浓度也不同。在细胞迁移的整个过程中,梯度取决于合适浓度和
梯度坡度。
恰当的实验体系选择受下列4个因素影响:①被研究细胞的运动速
率;②实验目的(鉴定一种因子是否具有趋化性或评价趋化机制);③完
成实验的恰当时间;④细胞和化学吸引剂的可靠性(实验取决于细胞数
目和化学吸引剂总量
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科