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正文:
酵母是一种易于培养的典型单细胞真核
生物,一直作为遗传学和分
子生物学研究的有力工具,有真核生物中的“大肠杆菌”的美称。
单倍体酵母细胞基因组为15Mb,含16条大小为200~2200kb的线性
染色体。它的单倍体核酸DNA容量仅为大肠杆菌基因组的3.5倍。
相比较而言,最大的酵母染色体仍然比哺乳动物的染色体的平均大
小小100倍左右。尽管酵母菌基因组很小,但它的许多生物学特性
与真核生物相似。它不仅含有高等真核生物细胞中有膜的亚细胞器
,而且还有细胞骨架。酵母DNA只在核内存在,尽管无组蛋白H1,
但染色体DNA的核小体结构与高等真核生物仍十分相似。酵母菌DNA
的转录由三种不同的RNA聚合酶完成,只有很少的基因出现内含子
,mR—NA(由RNA聚合酶Ⅱ转录)具有真核生物mRNA典型的转录后修
饰[如5’端加甲基化的嘌呤帽(methyl一G)和3’端加ploy(A)尾]等
特点。它的良好的遗传背景,为进行真核生物的基因操作提供了大
量的研究工具和可借鉴的经验。
培养酵母菌既简单、经济,又十分快捷,在营养丰富的培养基
中,大约90min的时间即可增殖一代。
支持酵母菌染色体功能的三种基本结构元件已经被确认和克隆
,它们分别是复制起点(ARS元件)、着丝粒(CEN元件)和端粒(telom
ere,TEL)。已经利用这些克隆化的元件构建了酵母人工染色体,
并应用于各种染色体行为的研究。利用这些结构元件,再加上克隆
化的酵母菌选择标记与大肠杆菌载体融合构建成穿梭载体,能分别
在大肠杆菌和酵母菌中自主复制并稳定存在。
大多数酵母载体都是能穿梭于酵母和细菌之间的穿梭载体。根
据不同用途,可分为克隆载体、表达载体、转导载体和用于诱变的
载体。根据复制方式,酵母载体也可分为两类。一类是整合载体,
这种载体在酵母中不能自我复制,只能通过同源重组整合到染色体
中而得以保存。这类载体的优点是某个基因一旦被克隆和整合之后
,将随染色体DNA而分离。因此该基因在细胞分裂时会更稳定。另
一类载体(它包括酵母着丝点序列),一般在克隆时作为一个CEN/A
RS盒,这类载体同时具有自我复制能力并且在细
出自http://www.bjsgyq.com/
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