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血清学鉴定方法
将可溶性抗原与其相应的抗体在溶液或凝胶中彼此接触产生肉眼可
见的不溶性抗原——抗体复合物沉淀。沉淀物产生的速度取决于它们的
比例、分子量大小、反应温度和盐的浓度;在某种程度上,也取决于溶
液的pH。利用抗原和抗体沉淀反应的这一特征,可以用已知的抗体鉴定
待测真菌与已知真菌的同源性。可采用以下3种方法。
1.环状沉淀这种方法是将抗原和抗体在一玻璃小试管中发生反应
。先将抗血清加在试管的下部,再将抗原液加在抗血清的上面,发生反
应后,由于抗原和抗体在接触的界面产生沉淀物,所以很快便出现使肉
眼可见的白色环带。
(1)稀释抗血清:将12支干净试管每管加入含1.0%一1.5%阿拉
伯树胶的生理盐水0.5ml。用0.5ml的移液管吸取0.5ml抗血清放入第
一管中,用此移液管将血清与生理盐水}昆合均匀,此时抗血清浓度即
稀释为1/2。移取该混合液的一半量注入第二管,则第二管含有的抗血
清为原液的1/4。按此法继续制成1/8,1/16……等两倍稀释的抗血
清。
(2)稀释抗原:抗原(可溶性)用生理盐水稀释为约含蛋白1mg/ml。
(3)加抗原:将稀释好的抗原0.5ml沿管壁徐徐加入,使之覆于抗
血清之上,37℃下保温;将生理盐水加入抗血清作为对照。
(4)观察结果:保温数分钟或1—2h后观察抗原抗体接触处是否形成
白色沉淀环。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科