标题：悬浮培养的细胞传代生物实验图像显微镜
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2016-12-24 1:09:32
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正文:
悬浮培养的细胞传代
1．每2～3天后细胞生长密集，轻轻地将悬液培养的细胞从孵育箱
中取出而不要摇动
它，此时细胞沉降在瓶的底部。去掉1／3的旧液，加入等量的预
热培养液。如果培
养液体积小于15ml，轻轻摇动培养瓶使细胞悬浮，然后水平放人
培养箱。
2．在不需要更换培养液的培养期内，只需摇动培养瓶使
细胞悬浮，观察培养液颜色的
变化，它直接显示细胞生长代谢状况。
3．当细胞生长到2．5×10的3次方个／ml时进行传代。从培养箱中取
出培养瓶，摇动以重悬细
胞。将一半的细胞悬液移入一个新培养瓶中，每瓶再补加预热的
培养液7～lOml，
然后放人培养箱。
1．用70％乙醇清洗血细胞计数板表面及其盖玻片，自来水轻微润湿盖
玻片的边缘，并
将它紧贴在计数板的沟槽上，水平盖住银色计数区。
2．对于单层贴壁生长的细胞，用胰蛋白酶消化法使细胞从壁表面
分离下来。3．按需要将细胞稀释成均匀的悬液，细胞团块均需分
散。4．用一支无菌的巴氏滴管取细胞悬液并将其转移至血细胞计
数板计数室的边缘，用滴
管头滴一滴在计数板盖玻片的下方，使之充盈到第二个计数室。
5．开始计数前将计数板静置几分钟，吸去多余的液体。用100×显
微镜观看到一个大方
格状的中心区。用手握式计数器计数四角及中心小方格内的细胞
数，其中压上线和
压左线的细胞包含在内。重复计数另一小室的细胞。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科