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正文:
培养条件
ES和ESL通常在一种缺乏明确定义的复杂培养条件下增殖。之
所以这么说,是因为培养体系中既有失去生长活性的饲养细胞又有
血清,因此,使得确定维持细胞生长和诱导它们形成特异性分化细
胞类型的生长因子以及其他必需因子的工作难上加难。尽管人们利
用化学组分明确的培养基成功地使鼠ES细胞分化,但不能利用该条
件维持分化。人们可以不用饲养细胞衍化和维持鼠ES细胞,也了解
饲养细胞的作用是产生通过gpl30受体信号介导的细胞因子,但无
法判断在两个全程以LIF代替饲养层的实验中早期非整倍体相对高
的发生率是有意义的或仅仅是巧合。为了弄清饲养细胞除了作为LI
F或相关细胞因子的来源以外是否还有其他的功能,有必要对这一
现象进行深入研究。细胞外基质产物的影响是一种可能性,但种属
之间的差异也可能起作用,因为人ESL细胞系的维持就不需要LIF,
使用饲养细胞但撤除血清会明显促进其克隆效率。人们在衍化和培
养包括人类在内的哺乳类ESL细胞系时常使用鼠饲养细胞,但近来
有改用人源性饲养细胞培养人ESL细胞系的倾向。这是一个重要进
展,因为人们不能接受在为了临床治疗而不是实验室应用的人ESL
细胞系培养中使用异种细胞(xenogeneic cell)。在这方面,猪细
胞实验的结果让人相当困惑。人们在一个实验中发现,衍化生成的
猪ESL细胞系必须使用鼠STO细胞才能维持永生化生长。此外,硬骨
鱼中的青鳝鱼和海鲤鱼,其最佳维持条件似乎是无饲养细胞培养,
而斑马鱼却不是这样。
出自http://www.bjsgyq.com/
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