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正文:
无细胞和细胞的体外模型系统的应用使细胞周期研究最近取得了长
足的进展。另一方面,它们和原位(即在组织和器官中)状态的关系
,对更好地理解细胞周期的
生物学以及将迄今获得的知识用于临床
的初始阶段是至关重要的。
我们将概述细胞周期蛋白的组织处理和免疫组化染色的某些基
本方案。虽然没有在组织切片上对每种蛋白都可以作免疫检测的通
用程序,但下述的步骤,以及可能的修改建议,必将可以使研究者
设计出一个对任何有兴趣的细胞周期蛋白进行免疫组化分析的程序
。
下列特点使得细胞周期蛋白的免疫组化检测特别有吸引力。
·自然组织环境中细胞蛋白质的检测,没有各种与体外模型必
然相关的人工产物。
·与基于检测细胞/组织的提取物的免疫印迹或核酸分析(仅
提供一个组织平均资料)不同,免疫组化更集中于单细胞水平的分
析。
·通过组织切片的免疫染色所获得的信息,包括亚细胞定位、
基因的组织或细胞型特异性表达和蛋白质含量的半定量估计
组织准备和储存
许多细胞周期调节蛋白质是摆动的或不稳定的多肽,因此,快
速地处理这些组织(最好在组织切离后数分钟内),必须保存足以供
免疫组化检测的未降解的靶抗原水平。最常用的两种组织保存方法
是:
·将制备冰冻叨片的标本冰冻
·将制备石蜡切片的标本固定和石蜡包埋
前一过程比较温和,因此更能保存完整的靶抗原表位。后一过
程提供更多的组织学细节,标本能长期使用,并代表了档案组织病
理学材料常常藉此收集的传统途径。
出自http://www.bjsgyq.com/
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