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正文:
免疫荧光法将荧光素与特异性抗体球蛋白用化学方法结合起来,但
不影响特异性蛋白质的免疫特性,制备成荧光抗体。当荧光抗体与
相应抗原(直接法)或抗原一抗体复合物(间接法)相结合时,即形成
免疫荧光复合物,可用
荧光显微镜观察反应结果,若显示亮绿色荧光,
即表示存在有相应的抗原或抗原一抗体复合物。目前最常用荧
光素为异硫氰酸荧光黄和罗达明。检测抗体可用间接免疫荧光法。
间接法是将抗原与未标记的特异性抗体(如患者血清)结合,然后再
使之与荧光标记的抗免疫球蛋白抗体(抗抗体)结合,三者的复合物
可发出荧光。本法的优点是制备一种荧光标记的抗体,可以用于多
种抗原、抗体系统的检查,即可用以测定抗原,也可用来测定抗体
注意事项
(1)在进行免疫荧光抗体试验时,要注意充分洗涤以避免非特异性
荧光。
(2)经免疫荧光抗体试验后,应及时在荧光显微镜下观察结果。如
不能及时观察应注意避光保存,以免荧光消退影响结果。
免疫荧光技术具有快迅、敏感、应用范围广等优点,但其不足之处
是荧光易消退,难以得到永久性标本,非特异荧光干扰较多,结果
判断的客观性差,需高精密的荧光显微镜设备等,使其应用受到一
定限制。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科