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正文:
人们要研究病毒侵染的细胞与健康细胞的细微结构,或是
病毒质粒在细胞中存在部位时,一般是把一小片细胞组织用适
当试剂固定.制成超薄切片,才能进行电子显微镜观察。
这是因为尽管电子显微镜的分辨本领很高.但电子穿透力却很弱,
样品切片太厚,电子穿不过被吸收无法成像.
超薄切片技术包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切
片和染色几个环节,简单概括为:将
生物组织用醛,例如,戊二
醛溶液固定,然后用饿酸或四氧化饿再固定。随后使样品脱水并
浸入待固化的硬塑料混合剂中包埋,待保温聚合、固化成型后即
可使用。所用的硬塑料有环氧树脂和各种甲基丙烯酸酷。包埋好
的组织块可用玻璃刀或金刚刀切成厚度为50-100 nm的薄片。
然后将所得切片用铀与铅盐染色后进行电子显微镜观察。如果选
用某些包埋介质,制得切片可以用专一的酶或染色剂处理,就更
利于识别某些特殊的化合物。如果细胞在固定之前吸收了同位素
标记的化合物,则样品可以用放射性敏感的薄膜覆盖,以便确定
放射性示踪化合物的位置。若切片中含有抗原性物质,则可以用
铁蛋白标记的抗体定位。由于超薄切片技术环节多,要求复杂,
因此在植物脱毒无病毒苗检测上,现在很少采用此法,而多用负
染色技术。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科