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正文:
当微注射多克隆或单克隆抗体,或偶联
荧光的分子时,对其进行检测的实验步骤较
短。基本上,我们按照上述的方法加以改进就可以了,即省去与第一抗体的滥育过程。如
果注人的是荧光标记分子,我们只需进行固定与封片两个过程。但是根据实验条件,尽管
已经进行了微注射,可能也需要与第一抗体进行进一步的温育
利用抗体和电子致密标记物,用电子
显微镜进行细胞外和细胞表面的抗原定位,在过
去的二十年间己经证明是非常有效的工具。但是细胞内成分的定位困难较大,因为必须
为抗体和标记物提供通路.同时又不能明显地改变细胞的细微结构.克服这一问题有如下
两个策略:
.利用去污剂或极性溶剂对固定细胞进行透化处理,这样会在一定的程度上(或是全部)
破坏细胞膜,使抗体与标记物能够进人细胞。然后再对细胞做后固定和用普通环氧树
脂包埋处理。这种技术被称为前包埋免疫细胞化学方法。
.先包埋固定的细胞,切片,然后与抗体和标记物一起温育。这种技术称为后包埋免疫细
胞化学方法。包埋在低温下进行.即在部分水溶性树脂中或在含有冷冻保护剂的冰冻
溶液中进行。
免疫电子显微镜技术常采用如下的标记物:
.辣根过氧化物酶(HRP)
.胶体金颗粒
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科