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正文:
显微镜吸收光度测量的方法学
1.测量装置:在一台显微镜上装设了光度测量装置(如单色器、光电倍增
管和测量光阑等)、电学系统(如光电倍增管高压电源、指示仪器和电快门等
)以及电子计算机等。
其中测量光阑位于中间像平面上,用于限定测量区。折射棱镜是可推拉的,
能够控制光路转换或者到目镜供观察,或者到光电倍增管供测量。显微镜吸
收光度计
2.吸收测量的光度调节。
(1)调节柯勒照明:实际上就是调节聚光器,使能得到最理想的照明条件
。柯勒照明的优点是照明均匀,照明场的大小能被控制。其步骤为:
①将视场光阑关到最小。
②用聚光器升降调节旋钮,垂直调节聚光器,直至在显微镜中观察到视
场光阑聚焦。
③用聚光器调中螺旋,使视场光阑的像移至视场中央(调中聚光器)
④打开视场光阑,使其边缘与视场同样大小(这一步骤目的是防止标本
不必要的受热,防止杂散光)。
(2)样品的聚焦:因为是对影像的光强度进行测量,所以必须注重影像的
质最,聚焦十分重要。正确的聚焦应由眼睛观察到样品的边缘为最清楚,因
为边界处有不同的光学性质,有最大的影像反差。可用白光或绿光观察,因
为人眼对绿光有最大的敏感度。实验表明:物镜放大倍数越大,数值孔径越
大,极微小的焦距变化将会引起很大的测盆值变化。
实际测量时,应一人操作以保持焦面一致。还应注意测盆样品时和测最
周围背景时聚焦条件的一致。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科