标题：显微镜荧光光度计量的原理-主要的优点有哪些
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作者:yiyi发布
时间:2014-5-5 15:42:15
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正文:
显微镜荧光光度术(microfluorophotometry)又称细胞荧光光度术(cyto
f luorophotometry)或定量荧光显微术(quantitative fluorescence micro
scopy)。显微镜荧光光度是在光学显微镜的分辨水平上进行荧光的定量和定
性分析。它的主要优点是:在显微镜下测定低浓度的反应产物，灵敏度比吸
收法高104次方。由于荧光物质本身就是发射的光源，因此在测定不均一分
布的发色团时，不存在分布误差的问题，所以测定方法简单;但由于存在荧
光消褪和荧光碎灭问题，测量也存在些特殊问题。
1.测定细胞内化学成分的含量:用荧光定量DNA, RNA、组蛋白、总蛋白
、精氨酸、赖氨酸、糖元和疏基，主要是利用特定的荧光染料与被测定物质
进行特异性的结合，并在一定的浓度范围内呈化学计量学关系，从而可根据
荧光强度来测定物质的含量，
2.免疫荧光的定最测定:视觉半定盘的方法只有在荧光强度相差2倍时，
才能判断出来，而利用细胞荧光光度计则能测出细微的荧光变化。
4.酶的动力学研究:细胞荧光光度术特别适用于活细胞或没有固定的组
织切片酶的动力学研究，例如通过测定还原型辅酶I结合到蛋白质的荧光变
化来分析氧化酶体系的变化。
5.微体积的显微荧光光度测定:免疫化学和酶化学研究常需要测定包含
在微滴、微毛细管或人工基质微球中微小体积的荧光反应产物。细胞荧光光
度计能准确的测定直径为1-50微米大小“微池”中的荧光。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科