标题：使用高倍率显微镜观察细胞是否有霉浆菌
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2013-8-26 17:30:52
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正文:
使用高倍率显微镜观察细胞是否有霉浆菌
霉浆菌测试
霉浆菌的污染很容易被忽视，本实验在一开始与后续的实验中不定期
的以 DAPI 染剂检测细胞是否遭受霉浆菌污染，以下为操作流程:
将养至八分满的细胞除去培养基，以 PBS 清洗细胞表面，再以 2%
formaldehyde 固定 2 分钟，固定完之后将 formaldehyde 去掉并以 PBS 清洗
细胞 3 次，每次 10 分钟，期间皆放置于旋转震荡器上轻微摇晃，之后以溶
于 PBS 的 0.5% triton X100，将细胞表面打洞，于室温下作用 30 分钟，接
着以 0.9%的盐 (NaCl) 水清洗 3 次，每次 10 分钟，作为染剂的 DAPI，其
使用浓度为 1 μg/ml，溶于 0.9%的盐水里，作用条件为室温 5 分钟，然后以
底下使用 UV 光源观察细胞
石腊包埋及 H&E 染色
待肿瘤成熟后，以组织切片的方式检视并证明分化的状况。将裸鼠背
部皮下的肿瘤取出，以 10%中性福马林固定后，将标本置于一系列递增的
酒精中脱水，再置换成二甲苯，最后以石腊浸润包埋。石腊标本以滑动式
切片机，切成 5 微米厚度之切片，将切片于温水浴中展平，并载于玻片上。
将玻片置于 40℃烤盘过夜，帮助切片与玻片之黏着。之后再将含切片之玻
片置于二甲苯与酒精中渐渐置换为水，进行脱腊的步骤，将脱腊后的标本
置于苏木紫染色液，染细胞核，染色 1~3 分钟，取出切片以自来水缓缓冲
洗 15 分钟后，再将切片置于伊红染色液，染色 5 秒，再经过不同浓度的酒
精脱水，退染色，最后浸入 100%酒精及二甲苯内澄清切片，即可以阿拉伯
胶树脂封片
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科