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正文:
珊瑚(Stylophora pistillata)进行实地观察、实验研究,藉以探究其与共生藻(zooxanthellae)之关系。
透过複式显微镜观察共生藻和珊瑚虫。使用细胞计数器计算共生藻数量,再除以珊瑚分枝面积可得共生藻密度。影响珊瑚白化最剧烈的因子是海水温度的极端高低温变化。
因此,
测量栖地水温为本研究监测对象。实验验证:短时间内水温剧烈降低或稍长时间温度稳定上升超出珊瑚适应范围,共生藻密度随之减少,造成白化
不同种类的珊瑚虫大小不同,从 1 ㎜到>10 ㎝都有。珊瑚虫身体的表皮层为两个胚层组成。
外面一层称为外胚层的细胞层是表皮层,里面称为内胚层的细胞层是胃皮层。共生藻居住在珊瑚虫的内胚层中。
複式显微镜(100×)下残留的珊瑚虫近照)。
a.以显微镜观察确定细胞经过 24-48 小时培养之后没有污染现象。
b.观察细胞是否已经形成单层 (monolayer) 的现象,第三天可更新细胞培养液;
若是仍为悬浮状,则维持观察,依实际的情形再做决定
从恒温培养箱取出已长有 70 %-80 % 满盘的细胞培养盘 (flask) ,经过显微镜观察无任何的污染现象,
喷洒 75 % 酒精之后置于无菌操作台,操作前擦乾再以火消毒瓶口。c. 吸去培养液,加入 10 ml PBS 缓衝溶液缓慢冲洗一次之后吸去;
再加入适量的 1X Trypsin-EDTA,均匀的润湿细胞之后将多馀的Trypsin-EDTA 吸出弃之,
再将细胞培养盘置于恒温培养箱中 3-5 分钟 (不需放松瓶盖) 。d. 轻拍培养盘身,见细胞由培养盘底顺利剥离,
经过显微镜观察,见其为颗粒状之细胞状态而非整块剥离即置于无菌操作臺
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科