标题：细胞培养试验专业显微镜-金相显微镜厂商
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2012-12-20 23:25:31
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正文:
1、细胞培养
将细胞培养基加入培养瓶内培养 (细胞菌株为 RAW 264.7
细胞，使用的细胞培养基为 DMEM )，置于 5 %二氧化碳培养箱 (控制温度 37℃)，24 小时后更换塑胶培养瓶内的培养液。
2、种植细胞于 96 微量板孔培养槽 ( 96-well microplates )由 5 %二氧化碳培养箱中取出培养瓶，观察细胞生长情
形，如达七、八分满时即可开始种植细胞；首先除去培养瓶内之培养基，加入 PBS 溶液，冲洗死细胞，并将之汲去。
加入 4 ml 的 trypsin-EDTA 冲洗瓶壁，放入 5 %二氧化碳培养箱中，10 分钟后取出，振摇瓶身使附着在瓶壁的细胞离开瓶
壁，取出此细胞液置于离心管中，另加 6 ml 的 DMEM 培养基后，于 3000 rpm 离心 10 分钟。
去除上清液，加入 10 ml DMEM 后，均匀混合，取细胞混合液 20 μl 与 20 μl 的锥蓝染剂 ( trypan ) 混合，于显微镜上观
察细胞总数，并于血球计数盘上计数细胞。取一个无菌的 96培养槽，吸取适当的细胞液注入每个培养槽上，使每个培养槽
刚好是 10000 个细胞数，完成后置于 5 %二氧化碳培养箱中 (控制温度 37℃)，培养 24 小时
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科