标题：显微镜下简称精液检查死,活精子！染色的方法
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2012-6-11 11:22:23
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正文:
人工生殖技术：精液检查死、活精子之染色：
此法乃利用死、活精子吸收染色剂之差异性为依据。此试验中，玻片上死亡之精子会吸收染色剂而呈蓝色，活精子不吸收染色剂而无色。染色剂之配制法如下：
A.染色剂 ─ 2 ％ 水溶性 eosin 溶于 M／8 之磷酸缓冲液中 (pH7.3)
磷酸缓冲剂：80.4 ml M／8 之 Na2HPO4
19.6 ml M／8 之 KH2PO4
B.染色剂 ─ 1 份 Opal blur 加 1 份 M／8 的磷酸缓冲液
A、B 染色剂等量混合，加热过滤后备用。
染色之方法：
滴 1~2 滴染色剂于乾淨载玻片上， 再滴入精液混合，上盖另一片玻片，去除多馀之染色剂，并用布拭淨玻片边缘，再将 2 玻片分开，置于加热盘 (65℃) 上使乾燥。
玻片乾燥后，以显微镜之高倍 (×1000) 来计数。通常计算精子 333 只，逢机取样，若部分精子仅核有染色，判定为死精子。活精子数可以公式＝活精子数× 3／10＝活精虫数 ％ 。
五、冷休克：
活精子在冷震盪前以不同染色剂染色，可测定活精子所佔的％。其方法如下：少量稀释过的精液样品浸入 0℃ 水浴中 10 分钟。俟冷休克后计算活精子的 ％。使用原精液时，很多精子会死，所以可依需要将原精液稀释，取 1 ml 做试验即可。稀释液拌演缓冲 剂及精子抵抗冷休克之保护剂。冷休克后活精子的 ％，在适当贮存条件下，可望维持活力 2~5 天。
六、精子的糖分解反应：
精子的解糖作用乃其细胞酵素及其他还原物质所致，将葡萄糖还原成酸（乳酸或其他）。许多研究者认为精子解糖作用为精子活力之能量来源，与其存活率无关。影响精子解糖速率之因子如温度、精虫活力、糖浓度、氢离子 浓度、酸度等。测定精子解糖速率是一定时间间隔前后，测葡萄糖含量与乳酸含量之化学分析。培养液中葡萄糖含量减少，酸度上升之变化，与精虫活力成正比。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科