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正文:
细胞的冷冻与解冻
在细胞冷冻方面,将长满在 T75 flask 中细胞用 trypsin-EDTA 打散成单细胞
悬浮液,以 1500 rpm 离心 5 分钟,倒掉上清液,加入预先配置好的冷冻保存液,
混合均匀后,以 1.0 ml 分装于冷冻保存管中,放置于-4℃, 15~30 分钟,再移至
-20℃, 15~30 分钟, 然后放在-80℃, 16~18 小时,最后保存在液态氮保存筒中备
用。
在细胞解冻方面,迅速取出放置于液态氮保存筒中的细胞冷冻保存管,然
后在 37℃ 水浴中来回震盪,使之快速解冻,解冻后取出放置在含有 10 ml RPMI
1640 培养液的 T75 flask 中,最后放置在 37℃ 5% CO2 培养箱中培养。
3. Vaccinia virus 病毒株之增殖
将 BHK-21 细胞培养于含有 10 ml 上述培养液之 T75 flask 培养瓶中至长满
底面积的 60%时,以 vaccinia virus M.O.I = 0.1 去感染 BHK 21 细胞,之后放置
于 37℃ 5% CO2 培养箱中培养 18~20 小时,然后取出部份上清液,以病毒斑形
成试验测定病毒效价
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科