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一、前言 掌握动情周期之状态，可使实验动物确实配种，达到实验动物计划性 繁殖的重要环节；其检测方式如阴道抹片、阴道电阻与内分泌检测等，在 此以最简单快速之阴道抹片检测法做介绍，藉由生理食盐水于阴道反覆冲 洗，取得剥落之细胞來作为判别依据。 小鼠为多发情动物(polyestrous)，且 全年均可繁衍，动情周期平均为4-6天，依其种别、飼料及飼养方式有差 異。 一般可将动情周期分为四个阶段，发情前期(proestrus)、发情期(estrus)、 发情后期(metestrus)、发情间期(diestrus)。

二、材料 (一)7-8周龄之CD-1母鼠。 (二)玻璃针、乳头滴管(冲洗阴道)。 (三)酒精灯(烧圆玻璃针前端)。 (四)生理食盐水(冲洗阴道)。 (五)载玻片(观察并染色)。 (六)Wright-Giemsa染剂(其他染剂均可)。 (七)PBS buffer pH 6.8(除去多余染剂)。 (八)倒立显微镜(观察细胞相)。

三、方法 (一)玻璃针以超音波震荡清洗干净，并施以湿热灭菌。 

(二)挑选外观正常7-8周龄之性成熟母鼠；如为群飼之母鼠，于试验前可 将些许公鼠使用过之垫料洒至母鼠籠，或注射激性腺素(gonadotropin)， 如孕马血清激素(pregnant mare serum gonadotropin, PMSG)与人类绒 毛膜激性腺素(human chorionic gonadotropin, hCG)，有利于后续之观 察。 

(三)以酒精灯之火焰边缘将玻璃针前端切口烧圆，可避免操作时造成阴部 伤害。 

(四)母鼠保定，以背抓之方式将其颈部及背部皮层固定，并观察外阴部之 变化。 

(五)将玻璃针小心插入阴道鞘(vaginal orifice)约1 mm，以少量生理食盐水 冲洗阴道數次。 切勿过于深入、过度撑大阴道及触碰子宫颈(cervix)， 可能造成伪怀孕(pseudopregnancy)之情形，不利于之后之观察。 

(六)将阴道冲洗液滴于载玻片之上，以另一玻片将其平均推开。 

(七)以Wright-Giemsa染剂(或单独使用Wright或Giemsa均可)，将推开 之阴道冲洗液完全覆盖，静置3分钟。 

(八)滴上PBS buffer pH6.8洗去多余之染剂，并将载玻片完全覆盖，静置 3分钟。 

(九)以水或PBS buffer冲洗载玻片，风干3分钟。 

(十)置于显微镜下观察，计算各种类细胞之數目及比率。

(十一)每日重复上述步骤执行一周，可得到各细胞于动情周期中之分布。 

(十二)动情周期之判讀 1.发情前期：行为上不接受雄性之交配。 此时期卵巢(ovary)表面前 一周期形成之黄体(corpora lutea)萎缩，新的濾泡开始发育，使雌

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