信息分类:站内新闻
作者:YIYI发布
时间:2012-3-11 23:52:09
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细菌培养观察用显微镜专卖!上海光学仪器厂北京分部
菌株与质体 (Strains and Plasmids)
本研究使用了三种菌,分别为枯草杆菌 (B.subtilis)、大肠杆菌 (E.coli)以及金
黄色葡萄球菌 (S.aureus)。本实验使用的枯草杆菌 (B.subtilis)菌株为野生型
PY79 的衍生。枯草杆菌是革兰氏阳性菌,在显微镜底下观察呈现杆状;金黄
色葡萄球菌为 MRSA 菌株,亦为革兰氏阳性菌,喜欢群聚生长,细胞型态为
圆球形;大肠杆菌使用的菌株为 K12-MG1655,为革兰氏阴性菌 。
细胞培养 (General cell cultures)
细胞皆培养于 LB 或 S7 minimal medium,并于指定的温度。实验使用 1 mMIPTG 诱导 Phyper-spank 启动子的活化。抗生素浓度的使用如下列所示: Kan 6
g/ml, Cm 6 g/ml, Lin 70 g/ml, Erm 1g/ml, Spec 100 g/ml。
萤光显微镜 (Fluorescence Microscopy)
进行 Time-lapse microscopy 观察前,会于 mounting frame (A-7816, Invitrogen)
上铺上 1% LB agarose,并区分为有加 1 mM IPTG 与未加 IPTG。细胞控制约
长到对数期中期,之后将细胞离心收下并培养在 agarose pad 上。细胞皆培养
在有温控的培养箱中,实验则使用 Axio Observer Z1 进行观察。
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