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显微镜使用油镜的原因,为什么视野模糊了用油镜就好了？

现代光学显微镜大体由光学系统及机械系统构成, 光学系统是利用目镜(eyepiece)和物镜(objective)两组透镜协调完成放大标本, 其中以物镜的性能最为重要, 它直接影响显微镜的分辩能力, 显微镜一般配有四个放大倍数的物镜,  观察及拍摄细菌以油镜(oil immersion objective)最有意义, 使用时亦和一般物镜不同: 被较低倍物镜及发现目标后, 接着将油镜对准载玻片标本(Slide specimen), 打量一下载玻片上光线落在穿越它而进入油镜的位置后, 略转开油镜, 并在载玻片上滴上显微镜专用香柏油(折射率 n = 1.515), 再把油镜旋回原处, 调节聚光器、载物台调节器(focusing control), 使映像清晰为止。
使用油镜技术的原因如下:
一) 增加照明之亮度: 由于 100x 的物镜直径很小, 焦距亦很短, 与其他低倍率物镜相比, 要提供相若亮度的观察效果, 所需光照强度却是最大的。一般物镜和标本之间的介与为空气(n = 1), 其折射率和玻璃 (n = 1.55)相差较大, 进入物镜的光线会因折射率的不同而产生折射或全反射, 加入与玻璃折射率相似的香柏油, 由于物镜和标本之间没有空气介界的干扰, 减少了射入物镜光线的损失, 增加了照明的亮度
二)增加显微镜之分辩率 : 分辩率(resolution)是表示显微镜能辩别两点之间最少距离的能力, 最大可分辩距离的数学式为 R =  λ/ 2NA (λ为光波波长: 0.4~0.7μm, 而 NA为物镜的数值孔径值 = n x sinα, n为介质的折射率, α为光线最大射入角之半, 一般应用最大为120度), 根据上式, 由于香柏油(n = 1.515)比空气( n = 1.0)的折风射率高, 因此使用香柏油能使 NA 值上升至1.2 ~ 1.4(其他物镜为 < 1.0), 而可见光波波长 λ =0.55μm为计, NA= 0.65的高倍物镜其 R值为 0.4μm; 而油镜的 R值约为0.2μm。

获得满意的显微映像后, 采用连接于目镜上的数位照相机(digital camera)将之拍摄下来, 如使用较低倍的显微拍摄, 会在标本上置一后直径为5μm金属线作为比对之用。