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动物组织培养倒置式生物显微镜查看细胞状况

在做白血球染色体时已大致介绍过：

1.MEM动物组织培养液的配製：依厂商说明之浓度, 将可高温高压消毒的MEM加入应有总量90﹪的dH2O, 然后高温高压消毒, 待冷却后加入10﹪牛血清, 及最终浓度2×10-3mM的L-glutamine. (若係维持液, 牛血清量可酌减).

2.Animal cell lines可向新竹食科所採购.

3.CO2培养箱内底层应加水内置少量CuSO4防霉, 保湿.

4.经常以倒置式生物显微镜查看细胞状况.

5.当细胞拥挤, 吸除培养液, 以生理食盐水洗细胞2次, (以25cm2培养皿言)加入1ml的0.25﹪trypsin-EDTA液, 使匀佈15sec, 吸除, 再等1min, 加入2ml培养液将细胞溶入, 然后吸除2/3, 保留1/3, 再加入4.3ml培养液, 即可.

6.对动物细胞的保存, 可将细胞以trypsin-EDTA液取出, 离心3,000rpm, 5min, 倒去上清, 以适量生理食盐水洗细胞1次(离心洗), 将细胞以最终浓度2×107/ml溶于含8﹪DMSO的培养液中,保存于小型胶管中,置4℃, 1hr, 0℃, 1hr, -20℃, 1hr, 再置-70℃, 保存.