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正文:

显微镜下去除植物细胞的细胞壁然后观察此圆球形的原生质体

本文亦介绍细胞的基因转殖的概念

本文章是让学生利用酵素去除植物细胞的细胞壁，然后观察此圆球形的原生质体（即植物细胞去除细胞壁），
学生可看到去除细胞壁后，植物的细胞的确有细胞膜存在。

另外，本文亦介绍''细胞的基因转殖''的概念。也就是，将外来的DNA插入细胞内。已被转殖的细胞有细菌、酵母菌、动物细胞以及植物细胞。不论转殖任何形式的细胞，细胞膜以及细胞壁或两者其中之一，必定要被穿透，然而却不能破坏到细胞。因此各种的技术被发展用来转殖不同形式的细胞，且大部份这些技术的机制，仍不是完全被了解的。一些植物可藉由Agrobacterium tumefaciens做为载体来转殖。然而，并非所有植物都能如此做，因此直接将DNA转殖是另一个方法。

以植物为例来说，在将DNA直接穿透细胞膜之前，首先决定性的步骤是先要移除其细胞壁。因此当分子生物学家准备要被转殖的各种形式植物，尤其是茄属植物（Solanacea）时，会先分离其原生质体。原生质体产生后，便可使用电破法（electroporation）或PEG法（polyethylene glycol）将DNA穿透进入细胞膜。至于DNA的微注射法（microinjection）则较少用。原生质体也可以用来做''原生质体融合''以产生溷种（hybride），但很少成功。来自不同种间，分别处理过的原生质体，可融合在一起，而可应用在细胞的杂交。【注：目前藻类的溷种十分地成功】

下列简单的实验是让学生制备原生质体以便观察，然而原生质体也可用来做真正的转殖或癒合组织的诱导及组织诱导的计划。但这些计划的步骤不包括在这篇文章中。

学习对象：

植物生物学的介绍

需要花费的时间：

两天，每天30分钟（作为原生质体的制备和观察用）。额外的活动、讨论、应用则将需要花更多的时间。

消耗性材料：

    * 新鲜的波菜叶（spinach）、烟草（Nicotiana rustica）、或喇叭花的叶子（petunia leaf）、或大型绿藻（Green Macroalgae）【注：藻类原生质体制备，其渗透压稍有不同】

    * 培养皿（一组一个）

    * parafilm或胶带，用来封住培养皿

设备：

    * 镊子（一组一对）

    * 针或大头针（一组两支）

    * 15毫升试管或小体积的烧杯

    * 有刻度的量筒（50ml）（全班几支）

    * 解剖显微镜或光学显微镜

    * 宽口的微量吸管（10ml）及安全吸球

    * 载玻片和一般的盖玻片--剪刀用来将叶子切成正方

化学药品：

    * 缓冲溶液（每组10ml）

    * 甘露醣醇（mannitol），作为缓冲溶液用

    * 软化酵素（macerase）（每组100mg）

    * 纤维酵素（cellulysin）（每组200mg）

出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科