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正文:
细胞悬液纯度
细胞分选型流式细胞仪应与细胞分析型区别对待。从电子学的角度
来看,虽然分选型流式细胞仪更为复杂,但其主要功能是为制备分选细
胞而设计的,因而不可在敏感性和分辨率角度方面过高要求此型仪器。
细胞分选过程中,选用的细胞悬液纯度好坏会直接影响分辨率的指
标。上述所有方法均可用于细胞分选。然而需要注意的是,可用活细胞
分选的却只有几项。这方面尚需进一步研究探索,以求发展。细胞分选
中更应论及的是技术局限性,首先,含分选细胞的液滴的间隔超过鞘液
中空液滴的15倍,这意味着细胞将大大地被稀释。正常情况下需将细胞
进一步浓缩,造成不可避免的丢失。
加快细胞分析速度将大大降低制备所得样品的纯度。厂家提供的喷
嘴流速被以为是获取良好制备结果的最佳选择,这一公认流速不超过50
00个细胞/秒。一般认为小于2000细胞/秒的流速更为有效。这一速度
适用于所有能流经喷孔的细胞。分选细胞的实际回收率取决于待分细胞
与待除去细胞之间的比例关系,因为计算机也一直在处理确切的细胞信
息。实际上,低频率含细胞液滴1:15可避免上述问题。在统计学上降
低细胞鞘液同时包括两个细胞的机率。
分选一种细胞使其达到所要数目,则要求分选周期加长,这无形中
增加下列潜在危险:细胞溶解碎片增多,细胞团聚,异物生成而堵塞喷
嘴,甚至导致喷孔流速改变。而这正是造成细胞流失及纯度下降的最重
要的原因。
上述方法学的所有过失都是根据我们的经验总结出的。流式细胞分
析技术和细胞分选技术正以它的先进性而被越来越多的科学家所认识。
出自http://www.bjsgyq.com/
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