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正文:
标本制备
所有的组织学、组织化学和免疫组织化学研究都可以在冰冻标本上
进行。固定和石蜡包埋会破坏纤维的结构,用这些标本不可能进行酶和
代谢研究。一些免疫组织化学染色可以用储存的石蜡包埋材料做,这取
决于抗体的性质,但进行全套的系列研究非常困难。在光学显微镜下,
横断面比纵断面能提供更多的信息。
理想的标本处理应在取材后尽快冷冻,尤其是计划要做
生物化学研
究时,但单纯形态学研究可以用从异地运输来的标本,必要时用轻轻沾
湿的纱布包起来,防止干燥,但延误不要超过几个小时。外地运输来的
标本因为变性的存在而影响生物化学检查,任何形式的商业化运输方法
都一样。从尸体解剖材料可以获得一些有意义的信息,但酶组织化学染
色几乎不能做。一些蛋白的免疫组织化学染色如肌球蛋白和层粘连
蛋白可以在死后的解剖标本中发现,但是肌营养不良素和胞浆膜蛋白在
尸体解剖材料不能被检出,主要取决于标本从患者死亡到冷冻的时问长
短。
将标本直接浸入液氮中会产生气态氮包裹在标本周围,从而延缓标
本冷冻的过程。更快冷冻过程和更好的保存组织结构的方法是放人在液
氮中预冷至一160 9C的异戊烷中进行冷冻。先将异戊烷装在容器内,而
后浸人液氮中,直至完全成为固态,而后复温到固态和液态并存的温度
点。
我们通常在标有标本名称的软塞上进行标本固定,这样标本容易从
恒冷切片机的夹头上取下并易于保存。标本放在软塞上,在标本的基底
部周围放上OCT固定剂。然后,将带标本的软塞放进处于液态的异戊烷
中。降温时间长短必须根据经验,部分依赖于标本的大小,通常10~20
秒就够了。时间太短,会引起肌纤维内形成冰晶的假象,而时间过长易
导致标本碎裂。冷冻的组织块在准备切片以前储存在一40℃或更低的温
度条件下。长期储存标本最好放在液氮内,避免停电造成损失。切片前
,软塞用OCT冻在切片机的标本托上。切片后,
出自http://www.bjsgyq.com/
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