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洋桔梗坏疽病毒 (Lisianthus necrosis viru s, LNV) 为晚近在中部地区洋桔梗上新发现及鑑定之球形
病毒。本试验利用光学显微镜、电子显微镜及三种血清学技术，探讨以其侦测及诊断 L N V 之可行
性。利用橙绿蛋白质染剂 (Calcomine orange-Luxol brilliant green BL) 染色罹病洋桔梗叶片表皮，以光
学显微镜可观察到细胞质内含有不规则束状类似内含体之构造。醋酸铀 (uranyl acetate) 溶液阴染罹病
叶片粗汁液或纯化悬浮液于电子显微镜下，可观察到直径约 3 2 n m 之球形病毒；超薄切片罹病叶片及
花瓣于细胞质内可观察到类似之病毒颗粒或病毒聚集之情形。以 L N V 兔子抗血清及老鼠单元抗体进
行西方转渍反应 ( Western blot) 可侦测到单一鞘蛋白基本单位 (coat protein subunit)，分子量约为 3 8
k D a。相同之抗血清进行间接酵素连结免疫分析 (indirect ELISA) 或三层酵素连结免疫分析 ( TA S
E L I S A )，L N V 罹病植物组织粗汁液全抗原之最终稀释倍数为 1 0-4 或 1 0- 5。于 2 6℃， L N V 罹病叶粗汁
液机械接种于洋桔梗幼苗，以直接组织转渍法 (direct tissue blot, DTB) 于接种后 1 2 小时即能侦测到新
複製之 L N V 抗原，而 indirect ELISA 则于接种后 4 8 小时始能侦测之，显然以 D T B 侦测新複製之 L N V
抗原的时间较 indirect ELISA 为早。
关键词：洋桔梗坏疽病毒、诊断方法

出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科