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正文:
根尖压片制备染色体样品
1.根据不同材料的根尖大小,从1—3个根上切下根尖。
2.将根尖放在Vectabond处理过的载玻片上,去掉根冠。
3.对于小根尖,加10μL45%乙酸,用“挤压针”挤压根尖,
直到释放出分生组织
细胞。对于大根尖,可纵向剖开,用一个小解剖刀将分生组织
刮到10-20吐
45%乙酸中。然后象上面那样挤压分生组织。
4.用皮下注射针或尖头镊子除去碎片(不要让细胞干燥)。
5.用皮下注射针头搅拌细胞悬液,并用45%乙酸调整体积至1
0—15社。
6.将准备好的盖玻片盖在细胞悬液上。
7.用滤纸条吸掉多余液体。
8.迅速地将载玻片在火焰上过1—2次。不要过热——载玻片
不应热到拿不住
的程度。
9.在盖玻片上放上滤纸,轻轻挤压。
Ⅱ0.用相差显微镜观察细胞,重复步骤8-9,直至细胞分散度
合适。
11.记下分散良好的中期细胞的坐标,并用金刚钻笔在盖玻片
上标记位置。
12.将载玻片浸入液氮中(用夹钳)速冻,或者盖玻片向上在干
冰块上放置至少5
min。
13.用解剖刀快速掀掉盖玻片,立即将载玻片浸入96%乙醇中
,至少5s。
14.在空气中干燥。将载玻片放人装有一袋硅胶的密封的塑料
玻片盒中,—20
℃保存。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科