叶片透化法(2)北京金相显微镜版权
信息分类:金相文章
作者:yiyi发布
时间:2011-12-10 17:43:56
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叶片透化法(2)北京金相显微镜版权
一、固定
取一片健康或感病之叶片，以FPA固定液直接进行固定，必须轻滴，盖过整片组织。固定24 hrs后水洗。
二、透化
利用饱和之水化氯醛进行透化24 hrs以上，依叶片组织不同，需透化之天数从数天至一个月，但透化过久较不易染色。可在小烧杯内进行透化，透化液需盖满整个组织，经抽气30 min后静置。若叶片很厚色素很多，则需更换透化液，透化液可重复利用。染色前先多次以水完全洗去透化液，才能接受下一阶段之染色。
三、染色
（1）以0.1％玫瑰红（Rose bengal）水溶液染色一分钟后水洗封片。或
（2）以甲苯胺蓝O直接染色10-15 min，水洗封片。或
（3）以（2）染色后水洗，再以（1）染色20秒，水洗封片。
叶片透化法前需要准备器材及消耗品
植物材料：叶片 如桂花叶
酒精
5％NaOH
加热器
chloral hydrate
蒸馏水
50％酒精
0.5％ safranin、95％酒精、100％酒精、二甲苯
封片胶
毛笔或小纸片
明视野显微镜*1
解剖显微镜*1
四、用途
1. 可用以观察叶片上气孔之分布、表皮细胞之排列及叶脉之走向。
2. 可用以观察病原菌入侵叶片后菌丝之分布及走向。
五、药品配制
※FPA固定液：福尔马林5 ml、丙酸5 ml、50％酒精90 ml。
※透化液：水化氯醛（Chloralhydrate） 250 g/100 ml 无菌水。
※甲苯胺蓝O（Toluidine blue O）：0.05％甲苯胺蓝O，以0.05 M枸缘酸缓冲液配制。
一、固定
取一片健康或感病之叶片，以FPA固定液直接进行固定，必须轻滴，盖过整片组织。固定24 hrs后水洗。
二、透化
利用饱和之水化氯醛进行透化24 hrs以上，依叶片组织不同，需透化之天数从数天至一个月，但透化过久较不易染色。可在小烧杯内进行透化，透化液需盖满整个组织，经抽气30 min后静置。若叶片很厚色素很多，则需更换透化液，透化液可重复利用。染色前先多次以水完全洗去透化液，才能接受下一阶段之染色。
三、染色
（1）以0.1％玫瑰红（Rose bengal）水溶液染色一分钟后水洗封片。或
（2）以甲苯胺蓝O直接染色10-15 min，水洗封片。或
（3）以（2）染色后水洗，再以（1）染色20秒，水洗封片。
叶片透化法前需要准备器材及消耗品
植物材料：叶片 如桂花叶
酒精
5％NaOH
加热器
chloral hydrate
蒸馏水
50％酒精
0.5％ safranin、95％酒精、100％酒精、二甲苯
封片胶
毛笔或小纸片
明视野显微镜*1
解剖显微镜*1
四、用途
1. 可用以观察叶片上气孔之分布、表皮细胞之排列及叶脉之走向。
2. 可用以观察病原菌入侵叶片后菌丝之分布及走向。
五、药品配制
※FPA固定液：福尔马林5 ml、丙酸5 ml、50％酒精90 ml。
※透化液：水化氯醛（Chloralhydrate） 250 g/100 ml 无菌水。
※甲苯胺蓝O（Toluidine blue O）：0.05％甲苯胺蓝O，以0.05 M枸缘酸缓冲液配制。
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