叶片透化法(1)北京金相显微镜版权
信息分类:金相文章
作者:yiyi发布
时间:2011-12-10 17:43:07
将本页加入收藏
下一篇：叶片透化法前需要准备器材及消耗品
上一篇：在显微镜下侦测显微切片之钾离子
叶片透化法(1)北京金相显微镜版权
（I）叶片透化
1. 用热酒精间接加热去除叶绿素（新鲜的叶子）；把材料放入水中煮直到叶片沉下去。
2. 把叶片移到装有5％或2％NaOH的烧杯中以去除叶肉。
3. 放入烤箱中一或几天；时常更新试剂；当叶子不再变色时即停止清除并徐缓地用蒸馏水清洗几次；假如材料上枝叶肉不能完全清除，可使用以下溶液：100㏄.蒸馏水中放入250克choral hydrate。把材料放入上述溶液后置于烤箱（50-100℃）里并常常检查。就如上述的清洗。
4. 把已清洗干净的材料储藏于50％酒精里或进行下一个步骤。
5. 在酒精系列中脱水并用二甲苯在Syracus表玻璃中清洗，亦可在一般的容器中进行脱水：50％的酒精、0.5％safranin、95％的酒精、100％酒精（2次）、100％ alcohol-xylene（1：1）、100％alcohol-xylene（1：1）、二甲苯，用Harleco包埋。
6. 如果有需要时，把重物压在盖玻片上，直到封胶干燥再移去。
7. 注意：处理材料可使用毛笔或用小纸片举起或用解剖刀。不要用镊子夹材料。
（II）叶片的清洗和染色步骤
1. 浸泡在热水和“Aerosol OT ”（3％soln.）中一小时，直到叶子软化。
2. NaOH（5％）在42℃下或温度更高的炉子里隔夜。
3. 用2.5％醋酸冲洗，之后用水洗三次。
4. 用1：1chloralhydrate和30％H2O2洗净叶子-----大约在50-100℃的炉子里5分钟。
5. 用水至少冲洗3次。
6. 50％酒精-----10分钟
7. 0.5％ Safranin溶在50%的酒精里-----隔夜
8. 用50％ EtOH冲洗。
9. 70％ EtOH-----15分钟
10. 95％ EtOH-----10分钟
11. 纯酒精-----15分钟
12. 重复步骤11
13. 1：1的酒精和二甲苯-----15分钟
14. 二甲苯-----15分钟
15. 包埋。
（I）叶片透化
1. 用热酒精间接加热去除叶绿素（新鲜的叶子）；把材料放入水中煮直到叶片沉下去。
2. 把叶片移到装有5％或2％NaOH的烧杯中以去除叶肉。
3. 放入烤箱中一或几天；时常更新试剂；当叶子不再变色时即停止清除并徐缓地用蒸馏水清洗几次；假如材料上枝叶肉不能完全清除，可使用以下溶液：100㏄.蒸馏水中放入250克choral hydrate。把材料放入上述溶液后置于烤箱（50-100℃）里并常常检查。就如上述的清洗。
4. 把已清洗干净的材料储藏于50％酒精里或进行下一个步骤。
5. 在酒精系列中脱水并用二甲苯在Syracus表玻璃中清洗，亦可在一般的容器中进行脱水：50％的酒精、0.5％safranin、95％的酒精、100％酒精（2次）、100％ alcohol-xylene（1：1）、100％alcohol-xylene（1：1）、二甲苯，用Harleco包埋。
6. 如果有需要时，把重物压在盖玻片上，直到封胶干燥再移去。
7. 注意：处理材料可使用毛笔或用小纸片举起或用解剖刀。不要用镊子夹材料。
（II）叶片的清洗和染色步骤
1. 浸泡在热水和“Aerosol OT ”（3％soln.）中一小时，直到叶子软化。
2. NaOH（5％）在42℃下或温度更高的炉子里隔夜。
3. 用2.5％醋酸冲洗，之后用水洗三次。
4. 用1：1chloralhydrate和30％H2O2洗净叶子-----大约在50-100℃的炉子里5分钟。
5. 用水至少冲洗3次。
6. 50％酒精-----10分钟
7. 0.5％ Safranin溶在50%的酒精里-----隔夜
8. 用50％ EtOH冲洗。
9. 70％ EtOH-----15分钟
10. 95％ EtOH-----10分钟
11. 纯酒精-----15分钟
12. 重复步骤11
13. 1：1的酒精和二甲苯-----15分钟
14. 二甲苯-----15分钟
15. 包埋。
点击咨询： 
有任何疑问可咨询电话： 010-64034191 / 010-84021761