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根段培养and有丝分裂周期的测定步骤

种植与萌发
1. 将豌豆种子以未稀释之漂白水chlorox搅拌6-7分钟。
2. 在无菌操作台将豌豆倒在覆有纱布的烧杯上。用火消毒镊子后将植物种子种在无菌的蛭石盆中。浇灌一瓶无菌水。把下种后的蛭石盆放在暗处4-5天，根部将可长到3-6 cm长。（注意计时）
4.    在剪下萌芽的根之前24小时，将下列器具放置在无菌接种台进行紫外光（UV light）照射。
a）大培养皿的底部（作为切割板）。
b）两个无菌的二次蒸馏水滴瓶。
c）一只镊子。
d）一只外科用刀片和刀柄。
e）全部以铝箔及纸巾包覆后，放在有铝箔覆盖的钢盘上。
f）将培养用三角瓶放置在无菌台之外。
根尖的切除
1. 用酒精烧烤培养皿且使其冷却；烧烤解剖工具且使其冷却下来。（注意：工具必需总是保持无菌状态，但不是热的。）
2. 放置几滴无菌水在培养皿内且移出足够的豌豆苗（12株），足供一三角瓶之培养。
3. 自每一个根段切下尖端1公分。切完12个根尖之后，打开三角瓶，以火烧烤瓶颈且小心把根放入三角烧瓶后覆盖瓶口。重复此切根步骤。直到4个烧瓶全取样完成。

培养，后标定与取样
1. 24小时后，加入0.025 ml 3H-TdR（讲员将示范）到每一个烧杯约标定30分钟。在标定后把根倒入覆有无菌纱布的烧杯上。且使用无菌技术将根转移到新鲜干净没有3H-TdR的新鲜White氏培养液中。
2. 在标定后，用无菌取样技术，每4小时取样四个根尖，即在0、4、8、12、16、20和24小时取样。（烧烤瓶颈，烤烧长镊子然后抽检根尖----在无菌台中工作）注意：分配取样时间，或尽可能的错开试验。
3. 将取样的根放置在新鲜的固定液瓶中（100％乙醇：冰醋酸3：1）。把瓶子暂放在冰箱中直到全部的样品取样完成。在每一个瓶子内投入铅笔书写的卡片卷标。
4. 将根进行Feulgen染色且准备压片。
5. 进行自动放射线显影------在4℃下进行12天之曝光，即将涂有感光乳剂之玻片接受3H放射线之感应作用。
计数
1. 显影，封上盖玻片和记数含放射线标定且进行细胞分裂的细胞数之百分比（labelled division figures, ％L.M.F.）。
2. 每一取样时段至少计数四段根，每根至少计数500个细胞。将取样时间与放射线标定，且进行细胞分裂百分比（％）之关系作成相关之坐标图。
3. 由作图之数据推算大略的细胞分裂周期之时间，及G1、S、G2、M分别所占之时间。


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