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细菌影响生长的因素测试方法与步骤：

1. 取 2 ml E. coli 菌液到含有 200 ml NB 中溷匀。
2. 取 0.1 ml 溷合液涂抹平板，37℃培养，作为 0 小时的细菌数。
3. 溷合液 37 震盪培养，每隔 2 小时取出 0.5 ml ，以无菌水 10 倍
连续稀释。直到 24 小时。
4. 将各稀释液取 0.1 ml 涂抹平板，37 ℃培养。
5. 纪录各个时间点的菌落数(cfu)，以菌落数对时间做图。

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温度

环境中的微生物生长温度范围含盖-5~80℃，但是每一种微生物都具有其适
合的生长温度范围，可生长的最高温度称之为最高生长温度，反之称为最低生长
温度，并只有一个最适生长温度，即此微生物生长速度最大时的温度。依最柿适
生长温度的不同又可区分为嗜高温菌 (thermophiles)、嗜中温菌 (mesophiles)、适
低温菌 (psychrophiles)。

菌种：

大肠杆菌 Escherichia coli

方法与步骤：

1. 连续稀释：将 6 支含 4.5 ml NB 试管标示 上 10-1、10-2、10-3、 10-4、10-5、
10-6。
2. 取 500 ul E. coli 菌液到标示 10-1 的试管中溷匀，再取 100 ul 的溷合液到标示
10-2 的试管。
3. 以相同的方法稀释 10-3、 10-4、10-5、10-6 倍并摇匀。
4. 以 4℃、37℃、或 60℃培养 24hr。
5. 从各管菌液中取 100 ul 到平板培养基 NA 中央。
6. 将 L 形玻棒过火，以 L 形玻棒将菌液均匀涂抹在培养基上，37℃培养 24hr
后观察记录。

pH 值

嗜酸菌分佈在酸性矿水、酸性热泉等地区，最适生长 pH 值在 3.0~3.5 之间
的环境中。嗜硷微生物可在 pH 11~12 的条件下生长，但在中性 pH 条件下却不
能 生 长 。 例 如 巴 氏 芽 孢 杆 菌 (Bacillus pasturii ) 、 嗜 硷 芽 孢 杆 菌 (Bacillus
alcalophilus )等细菌即是如此。在高 pH 的硷水泉中，曾分离出一种黄杆菌
(Flavobacterium )，它在 pH 11.4 的条件下生长良好。

菌种：

大肠杆菌 Escherichia coli
活菌乳酸菌

方法与步骤：

分别取一 loop 的 E. Coli、 B. subtilis 乳酸菌菌液到 pH 值分别为 3、4.6、7、

1.

9 的 3 ml NB 中溷合均匀。
2. 37℃培养 24 小时
3. 以分光光度计 OD600 测吸光值，并记录。
吸光值 0.1 表示约有 108/ml 大肠杆菌。

含氧量

微生物行有氧呼吸、无氧呼吸的程度不同，因而对氧气的需求量不同，又可
分为：
1. 好氧菌 (aerobic)：需要氧气来维持生长和繁衍。
2. 厌氧菌 (anaerobic)：在无氧的环境下生存，氧气对细菌造成氧化伤害而致死。
3. 兼性厌氧菌 (facultative anaerobes)：在有氧的环境下生长较好，但无氧的环境
下也能生存。

菌种：

大肠杆菌 Escherichia Coli
枯草杆菌 Bacillus subtilis
活菌乳酸菌

方法与步骤：

将装有 10 ml NA 的试管行湿热灭菌后，置于 50℃水浴锅直到温度到达平
衡。
以接种针取菌液，从 10 ml NA 的试管中央插到试管底部，控制组不行穿刺。
试管瓶口过火上盖，两手搓试管使菌液均匀。
试管以水降温后，37℃培养 24、48 小时观察并记录之。

渗透压

嗜盐菌通常分佈在晒盐场、盐湖、腌製品中以及世界上着名的死海中。嗜盐
菌能够在盐浓度为 15~20%的环境中生长，有的甚至能在 32%的盐水中生长。

菌种：

大肠杆菌 Escherichia coli
枯草杆菌 Bacillus subtilis

方法与步骤：

取一 loop 的 E. coli 菌液到 3 ml NB 中溷合均匀。

取一 loop 的 B. subtilis 菌液到 3 ml NB 中溷合均匀。
从各管菌液中取 0.1 ml 到盐度 0、0.85、1.7、3、10%的平板培养基 NA 中
央。
将 L 形玻棒过火，以 L 形玻棒将菌液均匀涂抹在培养基上，37℃培养 24hr
后观察记录。

4.

紫外光的照射

紫外光可分为 UV-A，UV-B 与 UV-C 三种。波长在 253.7 nm 之 UV-C 最具
有杀菌效果，一般被称为『杀菌光』
。紫外光照射细菌或病毒，导致细菌或病毒
之 DNA 或 RNA 产生结构变化，使其丧失複製能力，因而无法繁殖，最终命运
就是被消灭。

菌种：

大肠杆菌 Escherichia coli

方法与步骤：

取稀释 100 倍的 E. Coli 菌液到 5 个平板培养基。
将 L 形玻棒过火，以 L 形玻棒将菌液均匀涂抹在培养基上。
将 4 个平板培养基标示上 30 秒、1 分钟、5 分钟、以及 10 分钟。
以铝薄纸包裹培养基的一半后，进行 UV 照射 30 秒、1 分钟、5 分钟、10
分钟、以及光修复 10 分钟。
37℃培养 24hr 后观察记录。

结果：

1. 细菌生长曲线图

以时间对 cfu 作图，以时间为横轴，cfu 为纵轴，菌液进入 log phase 后的各

点应落在一直线上，连续测量至三个以上的测量值成一直线，利用此直线找出细

菌生长的加倍时间(doubling time)与平均生长速率(mean growth rate constant)。

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