评估影响细菌生长不同因子
a. pH 值:
取5l
μ 隔夜培养的菌液于四种不同 pH 值的 LB Broth 中,在 37℃温度下培
养,第二天纪录培养液生长情形。
b. 取接种环至菌液中,依划线法将菌液涂抹在 LB 平碟培养基上,分别置放
4℃、25℃、37℃及 50℃生长培养箱中培养,第二天纪录培养液生长情形。
c. 重複实验 b 步骤,但将细菌置放在无氧培养罐中,于 37℃生长培养箱中培
养,第二天纪录培养液生长情形。
4. 生长曲线製作及回归曲线计算
a. 取 1 ml 隔夜培养菌液至含 5 ml LB 培养液的 15 ml 试管中,于 0 小时、1 小
时、2 小时、3 小时及 4 小时分别取 1 ml 菌液,分别作下面实验。
b. OD550 测试
将菌液加入玻璃或塑胶测管(cuvette 或 cell)中,利用
分光光度计(spectrophotometer),以 550 nm 波长测定菌液的吸光值,纪录 OD550 值
c. 细菌数目计算
将菌液分别以十倍连续稀释,也就是 10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 倍后,以
下列方式计算
- 血球计数盘
取 10-4 倍稀释菌加在血球计数盘上后,盖上盖波片后,在
显微镜下计算及
纪录细菌数目。
- 涂抹法
在 0 小时及 1 小时,取 5 μ 的 10-4 稀释菌液涂抹在 LB 平碟培养基上,在
0l
42
2 小时、3 小时及 4 小时,则取 5 μ 的 10-5 稀释菌液涂抹在 LB 平碟培
0l
养基上,个培养基在 37℃生长培养箱中培养,第二天计算及纪录细菌数
目。
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