三种常用免疫定位的酵素之优缺点有哪些？
信息分类:金相文章
作者:yiyi发布
时间:2011-12-7 23:18:45
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三种常用免疫定位的酵素之优缺点有哪些？
AP
优点
1.较其它酵素有较低的nonspecific background
2.可应用在EIA、IB、IH（P）、IC等技术
3.多种可溶及不可溶的反应产物
4.大部分的受质及产物无毒性
5.反应速率属HRP为线性
缺点
1.易受Endogenous AP的影响
2.sensitivity较HER低，反应速率较慢
HRP
优点
1.因HRP含Fe故可应用在EM
2.可应用在EIA、IB、IH（P）、IC等技术
3. 多种可溶及不可溶的反应产物
4.反应速率快，故反应时间较短，且敏感性高
缺点
1.有些细胞有很高之background
2.须有较多blocking及 washing的步骤（HRP较顽强）
GO
优点
1.无Endogenous GO的问题
2.可应用在IB、IH（P）、IC形成不可溶的产物
缺点
1.不能用在EIA上
AP：Alkaline Phosphatase
HER：Horse radish Peroxidase
GO：Glucose Oxidase
AP 常用的试剂 颜色 应用技术 水溶性 备注
BCIP/NBT 蓝 IB、ISH 不可溶 最常用
PNPP 黄 EIA 可溶
HRP常用的试剂 颜色 应用技术 水溶性 备注
DAB 蓝黑 IB、IH IH、IB最常用
AEC 红 IH 可溶
4CN 蓝灰 IB 不可溶
TMB 蓝 IB 不可溶
ABTS 绿 EIA 可溶 EIA最常用
AP
优点
1.较其它酵素有较低的nonspecific background
2.可应用在EIA、IB、IH（P）、IC等技术
3.多种可溶及不可溶的反应产物
4.大部分的受质及产物无毒性
5.反应速率属HRP为线性
缺点
1.易受Endogenous AP的影响
2.sensitivity较HER低，反应速率较慢
HRP
优点
1.因HRP含Fe故可应用在EM
2.可应用在EIA、IB、IH（P）、IC等技术
3. 多种可溶及不可溶的反应产物
4.反应速率快，故反应时间较短，且敏感性高
缺点
1.有些细胞有很高之background
2.须有较多blocking及 washing的步骤（HRP较顽强）
GO
优点
1.无Endogenous GO的问题
2.可应用在IB、IH（P）、IC形成不可溶的产物
缺点
1.不能用在EIA上
AP：Alkaline Phosphatase
HER：Horse radish Peroxidase
GO：Glucose Oxidase
AP 常用的试剂 颜色 应用技术 水溶性 备注
BCIP/NBT 蓝 IB、ISH 不可溶 最常用
PNPP 黄 EIA 可溶
HRP常用的试剂 颜色 应用技术 水溶性 备注
DAB 蓝黑 IB、IH IH、IB最常用
AEC 红 IH 可溶
4CN 蓝灰 IB 不可溶
TMB 蓝 IB 不可溶
ABTS 绿 EIA 可溶 EIA最常用
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