生物标本之整体包埋法表皮永久包埋的过程

信息分类:金相文章   作者:yiyi发布   时间:2011-12-3 12:20:15 将本页加入收藏

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生物标本之整体包埋法

介绍用整体包埋的方法处理较小或较平坦的标本。各种种类的材料均可不经切片予以完整的包埋,然常需要去掉一些多余的组织,或缩小切片使成为更合适的大小。一般在整体包埋时常被提到的材料是丝状藻和菌类,藻类平坦的叶状体,蕨类原叶体,纤细的藓苔类植物,含有气孔的叶片表皮,腺毛或腺体,蕨类的孢子囊,小花和花粉粒等。
整体包埋展现许多切片无法展现的特色且对某些器官的整体保存性比切片更好。

例如,在制备好的蕨类原叶体中,对藏精器和藏卵器的发育过程可更方便追踪,比在切片中更容易显现出来。再者,整体包埋更有意思的是它使最易碎的纤细植物得以永久保存,红藻Antithamnion和Ceramium就是鲜明的例子。
诸多种类的标本制备方法事实上就是整体包埋,但常被分类到其它方法名称之下

例如花粉母细胞的抹片即是整体包埋,但是因为它们的目标被定位为细胞学的研究,而不是一般形态上的目的,于是它们被分类在其它地方。
木材或茎的徒手切片也可算是一种整体包埋,但它们的处理方式是如此不同,以致于需另辟一类。
在不同过程的描述中,显微镜下不同类型的材料需用不同的染色方法将在各别的切片制作过程中叙述。

 表皮永久包埋的过程
1. 取紫露草(Trandescantia sp., Zebrina, Wandering Jew)叶片使之凋萎1-2天之久。
2. 将叶背朝外使成弧形,以刀片浅横切叶表皮后撕下表皮层,将长条状之表皮层沉入水中,以避免组织卷曲。
3. 以纯酒精固定条状的表皮层10分钟。
4. 每隔3分钟依序放入不同百分比的酒精系列,95、85、70、50、30、10%然后再移到蒸馏水中。
5. 在1%Bismark Brown水溶液中染色3-5分钟。
6. 在蒸馏水中淋洗。
7. 每隔3分钟在不同百分比的酒精系列中脱水:10、30、50、70、85、95、100%。
8. 放入冬青油10分钟。
9. 把条状的表皮层切成每边约3 mm小方块。
10. 加一滴加拿大胶或Permount准备封片,封片时尽可能小心保留一点冬青油。
11. 在显微镜下检查,看看组织的外表层是否朝上。
12. 用干净的盖玻片封片,将玻片烘干,并除去多余的胶和贴上标签。

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