标题：简易标本制片技术简介-石蜡切片的制作原理
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2017-4-12 15:13:12
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正文:
简易标本制片技术简介-石蜡切片的制作原理
石蜡切片的制作原理是使加热后呈液态的石蜡渗透到材料中，与细
胞组织融为一体，冷却固化后，分割成小块，在石蜡切片机上制作切片
。为此，有一套繁复的逐步置换程序：首先将固定的材料以不同浓度的
酒精(或其他溶剂)逐级脱水，至细胞中的水分完全被无水酒精置换；再
用能与酒精混合的溶剂如二甲苯逐步取代材料中所含酒精；最后用能溶
于二甲苯的石蜡逐步置换二甲苯；当细胞完全被石蜡浸透后，冷却，包
埋成蜡块才能切片。粘贴在载玻片上的切片中充满石蜡，既不能染色又
不能观察，所以还必须用二甲苯逐步脱去石蜡，用酒精逐步脱去二甲苯
，再还原到水中，方可染色。染色后的切片，又要重复经过脱水、脱酒
精的逐级程序达到二甲苯阶段，然后以溶于二甲苯的树胶封藏，才能置
于显微镜下观察。你看这个程序包括：上行一下行一再上行往返多次的
倒腾，十分费工费时，从开始脱水到制成永久标本，往往需数天之久，
而且一步不慎，前功尽弃。
为了简化手续，研究者设计出一些简易制片技术流程。一种常用的
方法是整体染色(wholestaining)，即材料先以适合的染料染色，再脱
水埋蜡。这样制成的切片无需经过下行一再上行的步骤，可以直接用二
甲苯脱蜡后封胶。整体染色的效果一般稍逊于切片染色，但在大规模研
究中可以大大减轻工作量，提高工作效率。总之，衡量一项实验技术的
价值标准，除精确性外还应视其实用性；在许多场合下显得不够“高精
尖”的技术，在另一些场合可能用到实处，甚至成为不可代替的方法。
由于石蜡切片具有很大的优点，所以虽然以后相继发明了多种新的切片
技术，特别是适于制作更精细的半薄切片(semi—thin section)与超薄
切片(ultrathinsection)的超薄切片机，但它始终长盛不衰，至今仍在
众多实验室中占有一席之地；甚至在现代RNA分子原位杂交研究工作中
，石蜡切片仍被广泛应用。不过石蜡切片有两点最大的局限性：一是样
品制备程序中采用的固定剂、包埋剂、刀具以及切片机运行机制等环节
相对粗糙，影响精细的细胞学观察；二是切片厚度受限制，一般难以突
破4～5μm的低限，而半薄切片厚度为0．3～2μm；超薄切片更薄至纳
米级水平
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科