标题：经分离后的质粒,可用琼脂糖电泳加以鉴定
信息分类:站内新闻
作者:yiyi发布
时间:2017-1-20 12:54:52
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正文:
经分离后的质粒,可用琼脂糖电泳加以鉴定
质粒的分离大致包括细胞的离解、蛋白质和RNA的去除、染色体DNA
与质粒DNA分离等几个步骤。其中以质粒DNA与染色体DNA相分离的步骤
最为关键。
经分离后的质粒，可用琼脂糖电泳加以鉴定。不同质粒由于其结构
不同，其电泳迁移速度也不同，因而可进行分离和检测。如果把已知分
子量的DNA片段与待测分子量的DNA片段同时电泳，并比较电泳迁移速率
，可测定后者的分子量。质粒DNA经限制性内切酶水解后，从凝胶电泳
谱上出现的区带数目、每个带中相应DNA的大小，可以推测出酶切位点
位置和数目，确定该质粒的限制性酶切图谱。
使用质粒DNA小量制备的碱法，是一种非常可靠的方法，现也有使
用更简化的步骤。具体改进是加入溶液I、Ⅱ、Ⅲ离心后的上清液直接
用异丙醇沉淀，沉淀溶解后即用RNA酶A处理，然后用酚／氯仿以及氯仿
抽提，最后用乙醇沉淀。经改进后的碱法可节约实验时间，并能保证所
抽提DNA的质量。
出自http://www.bjsgyq.com/北京显微镜百科