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正文:
掌握最新的DNA操作技术需要熟悉一些相关的基本概念和实验技巧
。本章着重介绍了大肠杆菌以及用于将DNA引入细菌的质粒和噬菌
体等载体的
生物学特性和操作方法,并由此提供了一些基本概念和
实验技巧。
大肠杆菌是含有长约3000 kb左右的环状染色体的棒状细菌。
它能在仅含碳水化合物如葡萄糖(提供碳源和能量)和提供氮、磷和
微量元素的无机盐的极限培养基上快速生长。然而,如果用含氨基
酸、核苷酸前体、维生素以及其他一些细胞不能合成的代谢成分的
丰富培养基来培养,那么大肠杆菌的生长会更快。
当大肠杆菌在液体培养基中培养时,其开始裂殖前,先进入一
个生长滞后期。在丰富培养基中,它能在20~30min内复制一代,
这种指数生长相称之为对数期。最后,当培养基中的营养成分和氧
耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时,
菌体密度就达到一个比较恒定的值。
除了极少数的例外,大多数应用于DNA重组技术的细菌是大肠
杆菌K一12株的衍生菌株。许多分子生物学研究进展均得益于对这
个菌株以及以这个菌株为宿主菌的噬菌体和质粒所进行的研究;而
且现在应用的很多克隆技术也都得益于这个时期的研究成果。
在克隆方案中经常使用细菌质粒。在天然的大肠杆菌分离株中
可含有_些自主复制、环状的染色体外DNA分子,它们具有重要的生
物学功能如抗生素抗性和产生限制性酶。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科