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正文:
液氮保存法(一196℃)
适用范围
根据过去的经验和研究,得知大多数
微生物可用液氮保存。例
如,除病毒、噬菌体、立克次氏体、各种细菌、放线菌、真菌、螺
旋体、变形菌类、各种丝状菌、酵母、微小藻类、原虫之外,动物
细胞(红细胞、精子、癌细胞等)也可利用液氮保存。在这种意义上
,本法可说是适用范围最广的微生物保存法。特别是对霉菌的菌丝
、大多数藻类、原虫等冷冻干燥较困难的微生物的长期保存非常有
利。
一般的实际操作
在一196℃下保存微生物时,其生存率的高低,受降温过程冷
冻速度的影响特别显著,因此,对温度的调节要充分注意。在冷冻
保存中,如果温度上升,冰晶状态发生变化,就易导致菌的死亡。
因而要常常注意液氮的残存量,定期补添。
取将要保存的微生物的菌体,使之尽量浓厚地悬浮于含有适当
防冻剂的灭菌溶液(分散剂,其组成参阅各论)中。将这种菌液(O.
2~1毫升)分装于安瓿中,或者先把分散剂分装于安瓿中,再用白
金耳取斜面培养的菌体,移入安瓿内制备菌液亦可。另外,还有用
适当粗细的软木钻孔器钻取菌丝覆盖的琼脂平板,取数个使之悬浮
于分散剂的方法。霉菌的冷冻保存,不加防冻剂时生存率较高,应
特别注意。
分装菌液的安瓿要用煤气灯熔封,为了检验熔封的良否,可在
4℃下在适当的色素液中浸泡20---30分钟。
出自http://www.bjsgyq.com/
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