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负增差法不仅可以用于完整的材料,而且在将材料切成切片以后也
可以采用。为了得到切片的负增差,需预先用可以除去包埋物质的
适当溶液处理。如果标本是包埋在甲丙塑料中的,则可将带有切片
的网先放到二甲苯中浸泡30一40分钟,也可以放到丁基甲丙塑料单
体中浸泡2小时。然后在每个载网上(放切片的一面)滴加一滴2%的
磷钨酸溶液,滴后马上用滤幕氏将它吸去。等载网上所剩下的一薄
层溶液干燥以后,标本自p可放到电子显微镜中观察。应该记住,
建议使用的pH值(7.4)并不是对所有标本都是适用的。为此,可以
从pH7.4开始,逐步改变pH值,以获得最佳的结果。在锇酸中固定
的标本不适于进行负增差处理,因为它有很强的“正”增差。因此
,标本应该用福尔马林或褐尔马林与乙醇的混合物固定。 在光
学显微镜中巨甲丙塑料切片的磷究
为了观察细胞器,常常必须研究包埋在甲丙塑料中的组织块(用
在电子显微镜中的)的厚切片。为此,将在超薄切片机上或用普通
的刀片切下的切片放到一块涂有卵蛋白的盖片上,可以用一根细毛
来转移切片(把切片放到盖片上的一滴水中之后,再将它们展平);
也可以将盖片仔细地放到漂浮在切片机刀槽中的切片下面,然后提
起,~下就将切片安置到盖片上面。在安置好的切片千燥后,它会
紧贴在盖片上,郎可对之进行各种操作处理。没有除去甲丙塑料的
切片可以用天青B、甲苯胺蓝染色,也可以进行孕尔根(Feulgcn)反
应(在多聚糖上的反应),或用酶处理。但是将厚切片的甲丙塑料除
去以后再进行染色,可以得到好得多的结果。为了达到这一目的,
粘贴好了的切片应该先用甲苯处理5分钟,然后通过乙醇和水,用
铬矾的槽菁青溶液染色。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京显微镜百科